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目的:比较不明原因复发性流产和正常早孕女性蜕膜组织Notch1信号通路相关靶基因,研究kisspeptin和靶基因之间的关系,为kisspeptin协同孕酮通过Notch1信号通路介导子宫内膜蜕膜化的假说提供依据。方法:1、收集2019年3月—2019年12月于苏州大学第二附属医院生殖门诊就诊的 11个不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)和 10个正常早孕女性的蜕膜组织,mRNA array 比较两者间Notch1信号通路相关靶基因表达差异。2、基于 mRNA array 结果筛选出 Notch1、Jag2、Hes5,收集 2019 年 3 月—2019年12月于苏州大学第二附属医院生殖门诊就诊的19个URSA和12个正常早孕女性的蜕膜组织,采用免疫组化及Western-blot方法检测kisspeptin,Notch1、Jag2、Hes5在两组间的蛋白水平表达。3、细胞实验:(1)人类子宫内膜基质细胞(Human endometrial stromal cells,hESCs),E2、MAP及8-Br-cAMP联合诱导细胞蜕膜化,观察细胞形态学改变,以及随时间变化Notch1、Jag2、Hes5基因以及蛋白水平表达;(2)细胞分组,Control组:正常蜕膜化;Kisspeptin组:加入kisspeptin干预;siRNA组:转染Kiss-siRNA降低kisspeptin表达,观察三组之间Notch1、Jag2、Hes5基因以及蛋白水平表达。结果:1、Notch1通路相关靶基因在URSA患者蜕膜组织中几乎表现为一致的下调,其中表达下降超过3倍数的有NOTCH1、HES5、JAG2、LOR、SH2D1A、FZD2、DLL3、LFNG、PAX5、POFUT1 及 IL178 等。2、URSA患者蜕膜组织中kisspeptin、Notch1、Jag2、Hes5蛋白水平表达明显低于正常妊娠者(P<0.05)。3、光镜下观察蜕膜化过程中子宫内膜基质细胞的变化,细胞呈现变大变圆、核仁增大的典型改变,从24至96h,Notch1及其相关分子Jag2、Hes5基因以及蛋白水平表达逐渐升高(P<0.05)。Kisspeptin组Notch1蛋白水平表达升高,siRNA组则较Control组降低。Notch1、Jag2、Hes5基因在kisspeptin组表达上调,siRNA组表达降低。(P<0.05)结论:1、URSA与正常女性相比,蜕膜组织中Notch1通路相关靶基因表达减少,提示Notch1通路失调导致的蜕膜化过程受损可能是URSA的发病机制。2、URSA患者蜕膜组织kisspeptin、Notch1、Jag2、Hes5蛋白水平表达下降,kisspeptin促进Notch1及其相关分子Jag2、Hes5的表达,kisspeptin可能协同孕酮调控子宫内膜蜕膜化。