Nogo-A蛋白表达与少突胶质细胞瘤并发癫痫的相关性研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shenyemaizui
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第一部分不同病理分型胶质瘤癫痫发病率目的了解并比较不同病理分型胶质瘤癫痫发生率。方法回顾性分析本科2013年至2015年近三年间收治的经病理诊断明确的329例胶质瘤病历资料。结果星形细胞瘤癫痫发生率为25.9%,其中低级别星形细胞瘤(WHOⅠ-Ⅱ级)癫痫发生率34.8%,高级别星形细胞瘤(WHOⅢ-Ⅳ级)癫痫发生率16.5%,少突胶质细胞瘤癫痫发生率39.2%,其中WHOII级癫痫发生率46.2%,WHOⅢ级癫痫发生率16.7%,胶质母细胞瘤癫痫发生率16.7%,室管膜瘤癫痫发生率为0,节细胞瘤癫痫发生率为46.2%,混合型胶质细胞瘤癫痫发生率为62.5%,其他类型胶质瘤癫痫发生率为30%。因混合型胶质瘤、节细胞瘤、颅内室管膜瘤等病理分型的胶质瘤病例数较少,未进行进一步统计学分析。在少突胶质细胞瘤、星形细胞瘤、胶质母细胞瘤中,少突胶质细胞瘤癫痫发生率(39.2%)最高,相较于星形细胞瘤(25.9%),差异不显著(P>0.05),相较于胶质母细胞瘤(16.7%),差异有统计学意义(P<0.05),星形细胞瘤癫痫发生率高于胶质母细胞瘤,但差异不显著(P>0.05)。发生在额颞部的WHOⅡ级少突胶质细胞瘤癫痫发生率为58.8%,较相同部位的WHOⅡ级星形细胞瘤癫痫发生率(34.5%)高,但差异不显著(P>0.05)。结论少突胶质细胞瘤癫痫发生率在胶质细胞瘤中处于较高水平。第二部分Nogo-A蛋白在少突胶质细胞瘤癫痫组与非癫痫组瘤组织中的表达目的检测并比较Nogo-A蛋白在少突胶质细胞瘤患者癫痫组与非癫痫组瘤组织中的表达情况。方法将收集的23例少突胶质细胞瘤标本分为癫痫组与非癫痫组,采用免疫组织化学方法检测标本中Nogo-A蛋白的表达,对两组标本免疫组化图片行免疫组化评分,比较两组免疫组化评分:采用免疫印迹技术检测标本中Nogo-A蛋白的表达,应用图像分析软件分析其灰度值,比较两组Nogo-A/GAPDH比值。结果少突胶质细胞瘤癫痫组Nogo-A蛋白表达免疫组化评分为(6.79±2.00),高于非癫痫组(4.44±1.59),差异显著(P<0.05);免疫印迹实验显示癫痫组Nogo-A/GAPDH(0.814±0.217)较非癫痫组Nogo-A/GAPDH(0.540±0.153)高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论少突胶质细胞瘤癫痫组患者瘤组织中Nogo-A蛋白表达含量较非癫痫组显著升高,该蛋白可能与少突胶质细胞瘤并发癫痫具有相关性。第三部分Nogo-A蛋白对新生大鼠皮质神经元细胞内钙离子浓度的影响目的探索Nogo-A蛋白对新生大鼠皮质神经元细胞内钙离子浓度的影响。方法采用机械分离+酶消化法提取新生大鼠皮质神经元,培养成功后鉴定神经元,随后将培养7天的原代神经元按干预药物不同分为对照组(Krebs-ringer液)、Nogo-A蛋白组、Nogo-A蛋白+尼莫地平组和尼莫地平组,分别给予上述药物后,以Fluo4/AM标记神经元细胞内钙离子信号,采用激光共聚焦显微镜技术检测各时间点各组神经元胞内钙离子信号强度,对最终数据行统计学分析。结果加入药物后,对照组和尼莫地平组神经元细胞内钙离子信号强度在各时间点未见明显变化(P>0.05),而Nogo-A组和Nogo-A+尼莫地平组钙离子信号持续升高(P<0.05)。组间比较结果显示,在1 min时,4组间的神经元细胞内钙离子信号比较差异无统计学意义(P>0.05):在3、5、10 min时,尼莫地平组神经元细胞内钙离子信号与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而Nogo-A组和Nogo-A+尼莫地平组神经元细胞内钙离子信号较对照组和尼莫地平组同时间点比较均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Nogo-A蛋白能够引起原代培养的新生大鼠皮质神经元钙超载。
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