基于ERK信号通路探讨蝙蝠葛碱对胰腺癌细胞株BxPC-3的抑制作用

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yufengdong
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目的:观察蝙蝠葛碱(Dau)对胰腺癌细胞株BxPC-3的增殖抑制作用。观察Dau对ERK信号通路关键因子的影响,并探讨其可能作用机制。方法:对人源性胰腺癌细胞株BxPC-3体外培养。将实验分为4组给药干预:对照组(正常培养基),Dau高剂量组(48μg/ml),Dau低剂量组(24μg/ml),5-FU 组(50μg/ml)。1.台盼蓝染色检测BxPC-3细胞的生长情况;2.细胞划痕实验测定BxPC-3细胞的运动能力;3.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测BxPC-3细胞增殖的抑制作用;4.流式细胞术(FCM)检测BxPC-3细胞的凋亡;5.Real-time PCR 法检测 BxPC-3 细胞中 Raf mRNA 和 MEK1 mRNA 的表达;6.Western Blot法检测BxPC-3细胞中Raf蛋白和MEK1蛋白的表达。结果:1.Dau能够明显抑制人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖。2.Dau能够明显降低BxPC-3细胞的运动能力(P<0.01)。3.Dau高剂量组、Dau低剂量组和5-FU组的增殖抑制率分别为70.8 1%、44.62%和 58.50%。4.Dau高剂量组、Dau低剂量组和5-FU组上调细胞凋亡率,与对照组(Control组)比较,有显著差异(P<0.01)。5.Dau能下调BxPC-3细胞中Raf mRNA和MEK1 mRNA的表达,且差异显著(P<0.01)。6.Dau能下调BxPC-3细胞中Raf蛋白和MEK1蛋白的表达,且差异显著(P<0.05 或P<0.01)。结论:1.Dau能够明显抑制胰腺癌BxPC-3细胞的增殖和运动能力。2.Dau能够促进BxPC-3细胞的凋亡。3.Dau能够下调ERK信号通路关键位点Raf、MEK1 mRNA及蛋白的表达。4.Dau可能通过调控ERK信号通路发挥其对胰腺癌细胞株BxPC-3的抑制作用。
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