【摘 要】
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溶酶体是细胞内物质降解的主要场所,在细胞内外物质循环、细胞代谢与分化及稳态维持等方面发挥着至关重要的作用。溶酶体的功能异常导致多种疾病的产生。TFEB和TFE3是调控溶酶体发生的重要转录因子,当胞内或胞外的信号激活TFEB/TFE3时,二者就会被去磷酸化由细胞质转移至细胞核,结合在靶标基因的启动子区域,启动溶酶体相关基因的表达。但这两个转录因子从细胞质到细胞核的转移过程受哪些因子的调控并最终影响溶
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溶酶体是细胞内物质降解的主要场所,在细胞内外物质循环、细胞代谢与分化及稳态维持等方面发挥着至关重要的作用。溶酶体的功能异常导致多种疾病的产生。TFEB和TFE3是调控溶酶体发生的重要转录因子,当胞内或胞外的信号激活TFEB/TFE3时,二者就会被去磷酸化由细胞质转移至细胞核,结合在靶标基因的启动子区域,启动溶酶体相关基因的表达。但这两个转录因子从细胞质到细胞核的转移过程受哪些因子的调控并最终影响溶酶体的发生及功能,这方面还有待深入研究。本研究对人源TFEB/TFE3与秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）中同源蛋白HLH-30进行氨基酸序列及结构域比对。在线虫hq247（HLH-30::GFP）中对已报道可以激活 TFEB/TFE3 的基因let-363（mTOR）、gsk-3（GSK3β）、xpo-1（CRM1）RNAi后,发现HLH-30与人源TFEB/TFE3的结构和功能保守性较低。因此,我们将人源的TFEB/TFE3异源表达在线虫肠道中。在构建的多个线虫株系中,yqEx1470（Pvha-6TFE3::GFP）中TFE3的亚细胞定位和哺乳动物细胞中的定位一致。yqEx1476[Pvha-6TFE3（S321A）::GFP]中模拟去磷酸化状态的突变型TFE3（S321A）持续定位在细胞核中,该表型也与哺乳动物细胞中一致。我们通过TMP/UV方法将人源TFE3（yqEx1470）整合至线虫基因组,得到整合株系yqIs213（Pvha-6TFE3::GFP）,成功构建了筛选体系。由于TFEB/TFE3的活性与其亚细胞定位关系密切,我们因此对yqIs213进行了细胞核核膜及细胞核-细胞质穿梭相关蛋白的RNAi筛选。结果发现,imb-1/KPNB 1的RNAi促进TFE3的细胞核定位。KPNB1与Ran GTPase共同参与调控TFEB/TFE3的入核。并且KPNB1对TFEB/TFE3的核转运可能具有特异性。在培养细胞系中,使用KPNB1抑制剂Importazole处理细胞后,TFEB/TFE3同样滞留在细胞核内,并产生促进成熟溶酶体发生的效应。本研究发现的KPNB1特异性抑制剂Importazole可促进成熟溶酶体的发生,为溶酶体贮积病、神经退行性疾病及癌症等疾病的治疗提供了新的参考靶点,有着重要的生理学意义。
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2015年我国《刑法修正案（九）》增加了虐待被监护、看护人罪,为社会愈加频发的幼师虐童、护工虐老等事件提供了刑事规制依据。目前,虐待被监护、看护人罪入刑已经七年,然而司法适用率却并不高。由于犯罪主体、虐待行为等要件规定的不清晰,缺乏相应司法解释进行补充完善,导致本罪在司法适用中产生许多问题,具体包括:犯罪主体认定不一致、虐待行为的认定不明确、“情节恶劣”的判断标准较为模糊以及与相似犯罪适用混乱等。
有限责任公司是我国的一种重要经济组织形式,其具有规模小、效率高、易管理等特点,这些特点使得公司内部股东之间具有高度的稳定性,股东直接参与公司的经营管理,第三人的加入势必会对公司的经营管理理念和公司的和谐稳定造成一定的破坏,为了保证股东的顺利退出和有限责任公司的人合性,股东优先购买权制度应运而生。近年来我国公司企业迅猛发展,公司中源源不断的涌现出大量关于股东优先购买权的纠纷,立法对该制度的规定过于简
近年来,中国共产党更加重视法治建设,党内法规的数量逐渐增多、质量不断提升。然而,由于在立规实践中缺乏详细的规范指导,数量剧增的党内法规,质量出现了参差不齐的现象。对于党内法规制度建设而言,仅强调立法数量是远远不够的,而是要制定数量和质量兼有之的党内法规。党内法规不能与上位党规相抵触是维护党内法规内部一致性、系统性、科学性的要求,对于党内立规的“抵触”现象需要得到更多的重视。但目前来看,无论是立法者
受害人权益保障和行为人行为自由是侵权责任法意图调整的一对基本矛盾,这一矛盾在受害人特异体质这一因素介入时表现更为尖锐。当受害人的特异体质与侵权人的行为相结合导致损害后果发生或扩大时,特异体质对于赔偿责任是否有所影响是此类案件争议的焦点。立法上对此并没有专门的法律规定,理论界对此问题争论不休,司法实践中,最高人民法院发布的指导案例24号未实现发布所设想的目标,因此有必要寻找新的角度对特异体质受害人赔
本文利用位于昆明和上海多轴差分吸收光谱仪（MAX-DOAS）的观测结果,研究了对流层和平流层臭氧（O3）廓线的反演方法。目前,常规MAX-DOAS反演对流层大气成分廓线方法应用广泛,且相对成熟,利用差分斜柱浓度（DSCD）反演廓线的思路方法主要针对平流层分布较少的低层大气成分廓线。O3的分布特点不同于其他痕量气体,通过模拟实验发现,由于平流层O3含量显著高于对流层,导致平流层DSCD显著影响对流层
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