目的急性中耳炎(Acute Otitis Media,AOM)是耳鼻喉科最常见的感染性疾病之一,儿童尤其多见。肺炎链球菌(Streptococcus pneumniae,S.pn)是AOM的常见致病菌。最近研究指出,感染诱导免疫细胞发生糖酵解转变,糖酵解调控免疫细胞功能和炎症应答。但AOM的免疫代谢机制尚不清楚,本研究旨在探索AOM中糖酵解代谢在炎症反应和中耳损伤中发挥的作用及其作用机制。方法采用听泡穿刺注射法构建S.pn AOM模型,并使用糖酵解抑制剂2DG及iNOS抑制剂1400w处理后观察AOM中糖酵解代谢变化及对免疫防御的影响。通过检测糖酵解相关基因的表达及代谢反应物的产量评估糖酵解代谢水平。HE染色、免疫荧光、免疫组织化学及ELISA等观察2DG对S.pn感染后小鼠炎症反应、细菌清除、HIF-1α表达及细胞因子分泌的影响。结果S.pn AOM的免疫代谢特征是糖酵解关键酶和葡萄糖转运体及乳酸分泌转运体表达上调并伴有葡萄糖消耗增加和乳酸生成增多。HIF-1α作为糖代谢转换的调节因子,在AOM时明显上调,并调控促炎因子IL-1β、TNF-α的产生。糖酵解抑制剂2DG处理后HIF-1α表达下调且IL-1β和TNF-α产生减少。糖酵解促进S.pn清除、炎症细胞渗出、中耳组织损伤及中性粒细胞吞噬杀伤功能。此外,i NOS抑制剂处理后,AOM小鼠中耳糖酵解相关基因表达下调,葡萄糖消耗降低及乳酸产生减少,细菌清除受损。结论HIF-1α参与AOM中糖酵解代谢,AOM时增强的糖酵解代谢能够促进中耳腔内S.pn清除及加重中耳组织损伤,抑制糖酵解后中性粒细胞吞噬杀伤能力降低,从而限制中耳腔细菌的清除。此外,NO可通过调控糖酵解代谢而发挥杀菌活性。