邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对MIN6β细胞的毒性作用及维生素C、E干预效果研究

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目的邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)作为公认的环境内分泌干扰物应用广泛,易释放至环境中,使人群普遍暴露。流行病学及动物实验研究均表明DEHP暴露与糖代谢紊乱密切相关,但DEHP对胰腺β细胞毒性作用研究报道甚少。为评价DEHP对胰腺β细胞的损害及其可能机制,本实验选用MIN6β细胞作为研究对象,观察DEHP对MIN6β细胞生长活力、细胞凋亡及细胞周期的影响;同时研究抗氧化性维生素C、E干预后效果,对其可能的机制进行探究,为临床预防及治疗此类损伤所致的糖代谢紊乱提供理论基础。方法选用小鼠胰腺MIN6β细胞株为实验对象,染毒组用不同浓度的DEHP(0.25-2mmol/L)处理;干预组同时将DEHP(0.25-2mmol/L)、维生素C(50μmol/L)、维生素E(50μmol/L)与MIN6β细胞共培养。作用时间为16、48和72小时。通过MTT实验检测细胞活力,Annexin-V-FITC-PI染色流式细胞技术测定细胞凋亡率,PI单染色测定细胞周期。结果与溶剂对照组比(1)随着DEHP浓度剂量和时间的增加,MIN6β细胞生长活力受到抑制,细胞生存率明显下降(P<0.01);(2)不同浓度的DEHP亦可诱导MIN6β发生明显的细胞凋亡(P<0.01);(3)DEHP亦能明显干扰MIN6β细胞周期进程,使MIN6β细胞多停滞在G0/G1期,G2/M期与S期细胞比例降低(P<0.01)。(4)与单独DEHP染毒组相比,维生素C、E对DEHP诱导的MIN6β细胞生长活力下降、细胞凋亡率增高及细胞周期停滞具有保护作用。结论DEHP可导致MIN6β细胞发生细胞增殖抑制、细胞凋亡以及细胞周期停滞;维生素C、E对DEHP所致的MIN6β细胞损伤具有一定的保护作用。
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