前言 肾小球系膜细胞(GMC)的增殖通过影响细胞外基质(ECM)的分泌和对肾小球毛细血管的机械损伤而在肾小球硬化过程中发挥着重要作用。 基质金属蛋白酶(MMPs)是一组可降解ECM的酶系,在正常GMC内可有少量表达,能够抑制GMC增殖而延缓肾小球硬化。由于MMPs在GMC增殖性病变的初始阶段表达增多,以抑制ECM的分泌和沉积,故MMPs高表达细胞提示GMC的增殖受抑制。迄今共发现至少20种MMPs家族成员,不同的组织细胞分泌不同的MMPs分子型,在肾脏近年研究较多的是MMP-2。单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)为趋化性细胞因子之一,具有促进GMC的增殖及趋化单核巨噬细胞的功能,而后者更有促进肾间质纤维化的作用,故MCP-1的高表达提示系膜细胞的增殖活跃和肾小球硬化,即肾脏炎症性病变的进展。 综上,研究控制GMC增殖的机制有利于了解延缓肾脏病变的可能性,为临床干预提供依据。有研究发现阻断细胞内钙内流能够中止细胞的分裂增殖,但机制不明。我们拟通过观察不同种类及不同浓度CA(钙离子拮抗剂)对GMC的MCP-1和MMP-2表达的影响来探讨CA对GMC增殖影响的机制。 实验材料与方法 1.在无菌室中进行大鼠GMC的复苏,传代,培养。 2.取生长较好的第四代GMC,接种于六孔板,加盖玻片。24小时后GMC长满玻片,换成无血清培养液继续培养24小时后加入不同种类不同浓度的CA12个孔,2个对照孔不加药,继续培养24小时。