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目的口腔癌占全身恶性肿瘤发病率的5%,是当前世界上最常见的十大恶性肿瘤之一,其中,上皮源性的鳞状细胞癌占口腔癌的90%。据不完全统计,我国死于本病的每年约有8000多名患者,尽管包括手术、放疗、化疗在内的各种方法都在不断改进,但口腔鳞状细胞癌(oral squamous carcinomacell,OSCC)患者的五年生存率仅为50%左右,它严重威胁着人们的生命和健康[3]。近年来,国内外学者分别对鳞状细胞癌的蛋白酪氨酸磷酸酶基因(protein tyrosine phosphatase gene, PTEN),基质金属蛋白酶-7(matrixmetallo proteinase-7, MMP-7)和血管内皮细胞生长因子(vascularendothelial growth factor, VEGF)进行了大量的研究。1997年美国学者在人类第10号染色体上发现的一个新的肿瘤抑制基因—PTEN。该基因的突变失活与人类多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关,在细胞凋亡、细胞周期和细胞迁移过程中也起着关键性的作用。MMP-7是基质金属蛋白酶家族中分子量最小的成员,它作为基质溶解素的一种,具有高度蛋白溶解能力及广泛的底物特异性。MMP-7主要在各种肿瘤细胞上灭活,可以降解IV型胶原,蛋白聚糖,酪蛋白、层粘连蛋白、纤粘连蛋白等。MMP-7能通过裂解FasL来延长肿瘤细胞的生存,并且还能抵制阿霉素诱导的Fas/FasL(Fas及其配体FasL是近年来研究得最为深入的有关细胞凋亡的膜表面分子),介导肿瘤细胞的凋亡。 VEGF是一种具有高度特异性的血管内皮分裂原,它能够增强血管的通透性,促进肿瘤血管的生成,对肿瘤血管、内皮增殖和迁移发挥作用,为肿瘤快速增殖和转移提供条件。目前,关于PTEN、MMP-7和VEGF的研究主要集中在骨巨细胞瘤等方面,而在OSCC中的研究鲜有报道。本文应用免疫组化技术SP法检测OSCC和口腔正常组织中PTEN、VEGF和MMP-7的表达情况,研究PTEN、MMP-7和VEGF在OSCC中及癌旁正常组织中的表达程度,探讨三者表达水平与OSCC侵袭及相关临床病理特征之间的关系,为OSCC的发生机制提供理论基础,并且为其早期诊断提供新的思路。材料与方法采用免疫组织化学SP法,分别检测40例口腔鳞状细胞癌和40例口腔癌旁正常组织中PTEN、MMP-7和VEGF的表达情况,分析其与口腔鳞癌中病理分级的关系。1.实验标本取自于辽宁省人民医院口腔科2005年1月至2011年12月期间口腔科手术切除的OSCC病例,其中男25例,女15例,年龄41-85岁,平均64.5+7.5岁。所有病例均未行化疗、放疗和免疫治疗。经病理确诊为OSCC的石蜡标本40例,高、中分化组11例,低分化组29例。所有标本均经10%中性福尔马林溶液固定,常规石蜡包埋,并以同期手术切除的癌旁正常口腔黏膜组织石蜡标本40例作为对照组。2.实验方法实验标本连续切片,厚度:4μm,分别作HE染色和PTEN、MMP-7和VEGF免疫组化染色。所有染色均设阳性对照(用扁桃体组织做PTEN阳性对照;用胎盘组织做MMP-7阳性对照;用结肠癌组织做VEGF阳性对照;用PBS代替一抗做阴性对照)。结果1.PTEN在OSCC中表达率为45%(18/40),在口腔正常组织中为85%(34/40),差异有统计学意义(P<0.01);MMP-7和VEGF在OSCC中阳性表达率分别为75%(30/40)、70%(28/40),在口腔正常组织中分别为22.5%(9/40)、25%(19/40),差异有统计学意义(P<0.05)。2.PTEN、MMP-7和VEGF蛋白的表达与病理分级相关((P<0.05)。3.PTEN在OSCC中的表达与MMP-7和VEGF呈负相关(P<0.05)。MMP-7和结论PTEN表达下调和MMP-7和VEGF高表达与OSCC的发生发展密切相关;联合检测三者的表达对了解OSCC的恶性行为有重要的临床参考价值。