【摘 要】
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背景周围神经损伤（Peripheral nerve injury,PNI）预后差,致残率高,导致感觉、运动和自主神经功能丧失以及神经病理性疼痛。尽管周围神经具有很强的再生能力,但神经再生缺乏特异性。轴突再生无序和靶器官错误重连所致神经功能恢复效果差,这是周围神经良好的再生能力与神经功能恢复欠佳所存在矛盾的主要原因。目前,自体神经移植仍然是PNI治疗的金标准。然而,该方法也有许多局限性,只有约80%
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背景周围神经损伤（Peripheral nerve injury,PNI）预后差,致残率高,导致感觉、运动和自主神经功能丧失以及神经病理性疼痛。尽管周围神经具有很强的再生能力,但神经再生缺乏特异性。轴突再生无序和靶器官错误重连所致神经功能恢复效果差,这是周围神经良好的再生能力与神经功能恢复欠佳所存在矛盾的主要原因。目前,自体神经移植仍然是PNI治疗的金标准。然而,该方法也有许多局限性,只有约80%的患者实现了完全神经功能恢复。因此,迫切需要促进神经功能恢复新方法。剖析PNI再生过程四个关键阶段:（1）巨噬细胞介导损伤远端瓦勒式变性,清除髓鞘及轴突碎片;（2）雪旺细胞（Schwann cell,SC）增殖活化分泌神经营养因子,为轴突再生提供最佳微环境;（3）血管生成及SC迁移形成Büngner带,引导轴突再生;（4）再生轴突穿过神经桥与靶器官重联。有序轴突再生即通过调节血管生成、SC迁移及瓦勒式变性介导的神经特异性再生。血管化是神经重建重大挑战之一,神经内血管生成作用常常被忽视。在脊椎动物中,血管化对神经再生至关重要,血管化先于神经发生,同时与负责神经系统连接的结构原理和分子机制类似。SC是神经损伤修复的基石,为神经营养因子主要来源,迁移形成生长锥引导新生轴突并形成轴突外髓鞘,促进PNI后神经功能恢复。本研究聚焦于改善神经再生微环境,以血管生成及SC迁移为切入点,调节PNI修复关键病理生理学过程介导有序轴突再生,探讨有序轴突再生对神经功能恢复的作用及机制。目的1.研究有序轴突再生对神经功能恢复的作用。2.揭示黄芪多糖（RAP）加速血管生成介导有序轴突再生对神经功能恢复的作用及分子机制。3.探讨Netrin-1促进SC迁移介导有序轴突再生对神经功能恢复的作用。方法1.通过步态分析及坐骨神经功能指数（Sciatic nerve function index,SFI）研究有序轴突再生对大鼠神经功能恢复的作用。2.利用组织学及免疫荧光染色探讨RAP及Netrin-1对有序轴突再生的作用。3.通过免疫荧光染色研究RAP对坐骨神经血管生成的影响。4.采用透射电镜扫描及甲苯胺蓝染色揭示RAP对轴突再髓鞘化的作用。5.通过划痕实验、Transwell实验及小管形成实验探讨RAP对内皮细胞生物学功能的影响,通过划痕实验及Transwell实验探讨Netrin-1对SC生物学功能的影响。6.通过RNA-sqe、免疫荧光共定位染色及Western blot探索RAP促进血管生成的具体分子机制。结果1.加速血管生成及SC迁移介导有序轴突再生促进神经功能恢复。2.RAP治疗组内皮细胞迁移数、小管分支数均高于对照组（P＜0.05）,此外,相较于PNI组,RAP治疗组轴突排列更加有序紧密,RAP治疗组神经再髓鞘化程度明显较好（P＜0.05）,RAP显著加速神经血管生成（P＜0.05）,RAP治疗组神经功能恢复更好（P＜0.05）。3.Netrin-1治疗组SC迁移数均高于对照组（P＜0.05）,此外,相较于PNI组,Netrin-1治疗组轴突排列更加有序紧密,Netrin-1治疗组神经功能恢复更好（P＜0.05）。结论1.有序轴突再生促进神经功能恢复。2.RAP通过激活AKT/eNOS信号通路加速血管生成介导有序轴突再生。3.Netrin-1通过促进SC迁移介导有序轴突再生。
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