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黄瓜枯萎病是由半知菌亚门镰孢菌(Fusarium spp.)侵染引起的一种土传病害,是影响黄瓜生产的最主要病害之一。由于保护地的特殊环境条件和长期连作,土壤中病原菌量的积累越来越多,致使黄瓜枯萎病等土传病害发生逐年加重。本研究通过对中国8个地区黄瓜根茎镰孢菌进行分离、鉴定及多样性研究,旨在明确中国8个不同省市黄瓜枯萎病的主要致病菌及其遗传多样性,为黄瓜枯萎病的科学诊断、生理分化及抗病育种奠定基础。1.对采集自哈尔滨、长春、沈阳、北京、保定、银川、西宁及杭州8个城市的478株镰孢菌进行形态学及分子生物学鉴定,确定它们属于7种镰孢菌,分别为尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum),锐顶镰孢菌(Fusarium acuminatum),木贼镰孢菌(Fusarium equiseti),腐皮镰孢菌(Fusarium solani),半裸镰孢菌(Fusarium semitectum),轮枝镰孢菌(Fusarium verticillioides)和层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)。其中尖孢镰孢菌占77.62%,锐顶镰孢菌占0.21%,木贼镰孢菌占3.97%,腐皮镰孢菌占15.48%,半裸镰孢菌占1.46%,轮枝镰孢菌占0.84%,层出镰孢菌占0.42%。2.对分离得到的478株镰孢菌进行致病性测定结果表明,尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)为哈尔滨、长春、沈阳、北京、保定、银川、西宁和杭州地区黄瓜枯萎病的主要致病菌。虽然在上述地区的黄瓜枯萎病株上同时分离到腐皮、木贼、锐顶、半裸、层出和轮枝镰孢菌,但接种后各菌株均未见侵染症状,属非致病菌。3.通过对478株镰孢菌菌株生长速率与致病力进行相关性分析得知,菌株生长速率与病情指数之间相关性显著,这也表明菌株的生长速率快致病力相应就高,致病力的高低与生长速率快慢有关。4.应用AFLP分子标记检测了中国8个城市黄瓜枯萎病菌的遗传多样性及不同地区菌株间的亲缘关系。在130对引物组合中,筛选出16对多态性好、带型清晰的引物组合。利用这16对引物组合对371株尖孢镰孢菌进行了PCR扩增,共扩增出123082条带,其中多态性标记53463条,占43.44%。利用NTSYSpc软件中UPGMA算法构建了黄瓜枯萎病菌的亲缘关系树状图,聚类分析结果表明中国黄瓜枯萎病菌的遗传多样性与病原菌的地理来源有一定的相关性,同时中国黄瓜枯萎病菌遗传分化较大,不同地区群体遗传多样性比较丰富。5.利用筛选出的引物组合E14/M11对尖孢镰孢菌(F.oxysporum)、腐皮镰孢菌(F.solani)、木贼镰孢菌(F.equiseti)、锐顶镰孢菌(F.acuminatum)、半裸镰孢菌(F.semitectum)、轮枝镰孢菌(F.verticillioides)和层出镰孢菌(F.proliferatum)这7种不同的镰孢菌进行AFLP分析结果表明,此7种镰孢菌遗传分化较大,应用AFLP技术能够对镰孢菌亲缘关系的远近进行划分。