目的探究从人脂肪组织纯化血管外膜细胞的可行性方法,鉴定CD146+人脂肪源性血管外膜细胞（human adipose-derived pericyte/perivascular cells,CD146+hAD-PCs）的生物学特性,并建立体外共培养体系探究其是否具有对人脐血（Umbilical cord blood,UCB）CD34+造血干/祖细胞（hematopoietic stem/progenitor cells,HSPCs）体外支持的作用。方法1.通过酶解法及多参数流式细胞术（multiparameter flow cytometry,MFC）从人大网膜脂肪组织中分选纯化CD146+hAD-PCs并进行体外扩增。2.生物学特性鉴定:（1）采用倒置显微镜及CCK-8法连续观察不同代次CD146+hAD-PCs细胞形态及增殖活性;（2）MFC检测CD146+hAD-PCs细胞表面标记物表达情况;（3）体外诱导CD146+hAD-PCs成脂肪、成骨及成软骨分化鉴定其多向分化潜能。3.建立体外共培养体系:实验组以CD146+hAD-PCs为基质细胞与免疫磁珠分选后的UCB CD34+HSPCs共培养,阳性对照组以BM-MSCs为基质细胞与UCB CD34+HSPCs共培养,空白组以UCB CD34+HSPCs单独培养;于共培养后的第1周、2周和4周对UCB CD34+HSPCs的细胞数量、集落形成、造血标记表达及上清中造血因子分泌进行检测统计分析。结果1.酶解法及MFC分选得到的CD146+hAD-PCs经回测细胞纯度可达（92.08±0.86）%,（n=5）,体外培养能够稳定传代。2.生物学特性鉴定结果显示:（1）CCK-8法检测CD146+hAD-PCs增殖情况表明,P6、P9代CD146+hAD-PCs培养至第4天开始处于生长对数期,生长曲线近“S”型,P12代细胞增殖活性较差,与P6代细胞相比具有显著差异（P<0.01,n=5）;（2）经MFC检测CD146+hAD-PCs高表达MSCs表面标记CD44、CD73、CD90、CD105;（3）CD146+hAD-PCs体外诱导能够向脂肪细胞、骨细胞与软骨细胞分化。3.体外共培养结果显示:（1）UCB CD34+HSPCs细胞增殖结果显示:实验组（CD146+hAD-PCs组）及阳性对照组（BM-MSCs组）共培养的UCB CD34+HSPCs细胞数在第1周略有增长,空白组（无基质细胞组）细胞数降低,数量无统计学差异（P>0.05,n=5）;第2周时CD146+hAD-PCs组和BM-MSCs组细胞数继续增长达到高峰,无基质细胞组细胞数持续降低,差异具有统计学意义（P<0.05,n=5）;第4周时CD146+hAD-PCs组和BM-MSCs组细胞数略有下降,无基质细胞组细胞全部死亡,差异具有显著意义（P<0.01,n=5）,CD146+hAD-PCs组和BM-MSCs组细胞计数各时间点无统计学差异（P>0.05,n=5）。（2）UCB CD34+HSPCs集落形成结果显示:CD146+hAD-PCs组和BM-MSCs组形成的集落数量各时间点无统计学差异（P>0.05,n=5）。（3）血细胞标记表达结果显示:CD146+hAD-PCs组和BM-MSCs组在共培养1周、2周和4周时CD45+、CD34+CD33-、CD10+/CD19+及CD14+表达比例均无统计学差异（P>0.05,n=5）。（4）上清中细胞因子分泌结果显示:CD146+hAD-PCs组在1周时SCF和2周时G-CSF表达量高于BM-MSCs组,差异具有统计学意义（P<0.01,n=4）;CD146+hAD-PCs组在2周时IL-2,在4周时SCF、G-CSF和VEGF表达量低于BM-MSCs组,差异具有统计学差异（P<0.05或0.01,n=4）;CD146+hAD-PCs组和BM-MSCs组的IL-3、IL-6、TPO、IFN-γ及TNF-α表达量各时间点无统计学差异（P>0.05,n=4）。因空白组无基质细胞滋养致细胞迅速死亡,故不进行集落形成、血细胞标记表达和细胞因子表达的统计分析。结论人脂肪组织通过胶原酶消化及多参数流式细胞分选得到的CD146+hAD-PCs纯度较高,经体外培养稳定传代且具有间充质干细胞特性,并在体外作为基质细胞具有与BM-MSCs相似的支持UCB CD34+HSPCs的能力。