近年来生命科学和信息科学的不断发展推动药物研究模式发生了巨大的变化，传统的药物—受体—基因研究模式正在向基因—受体—药物这—新的研究模式转变。首先是从基因和蛋白水平研究疾病发生的相关机制，发现并确证药物作用的靶标，然后针对这些靶标有的放矢地寻找药物。因此，现在的新药研发主要由三部分组成，包括新靶标的发现与确证、新先导化合物的发现与优化以及药物开发。本文主要从新靶标的确证以及药物先导结构的发现两个方面进行了研究。 1．白血病耐药新基因sorcin的确证 化疗在肿瘤治疗中具有重要地位，其最主要的障碍之一就是肿瘤细胞对药物耐受性的出现，尤其是多药耐药的发生。为了了解多药耐药可能的新的分子机制，发现参与白血病耐药的相关新基因，寻找诊断和治疗耐药的新靶点，本实验组用cDNA Microarray对K562与其耐药细胞系K562／A02 mRNA的表达进行了差示分析，发现sorcin基因在K562／A02细胞中的表达水平明显高于K562细胞。对sorcin基因表达进行临床资料分析的结果也表明其过度表达与白血病患者临床耐药密切相关。 为了阐明sorcin基因参与白血病耐药的机制，本研究利用RT-PCR方法从白血病多药耐药细胞K562／A02中克隆得到了全长sorcin基因，成功构建了重组载体pcDNA3.1／sorcin。通过脂质体介导将外源sorcin基因转入人白血病细胞K562中，经过筛选得到了一株sorcin稳定高表达的K562／S4细胞。导入外源sorcin基因的K562／S4细胞对阿霉素、长春新碱、依托泊甙、高三尖衫酯碱等多种化疗药物产生了4.1～22.5倍的交叉耐药，表现出典型的MDR表型，而且这种耐药性的增加还与sorcin基因扩增和蛋白过表达的高低相一致。与野生型K562细胞相比，K562／S4细胞内游离钙离子浓度降低，抵抗血清饥饿能力增强，外排泵功能增加，这些都可能是sorcin过表达介导细胞多药耐药的内在机制。 我们还进一步设计并合成了两段针对sorcin基因的siRNA序列(SⅠ和SⅡ)。