研究目的： 免疫治疗是继手术治疗、放疗、化疗及生物治疗之后肿瘤治疗的又一新方法，其技术、方法日趋成熟，治疗过程的安全性逐步提高。但是如何进一步提高治疗效率、降低复发率及各种并发症，提高患者生存质量已成为肿瘤免疫治疗领域的一项重要研究内容。树突状细胞(Dendritic cell，DC)是目前已知的功能最强的抗原递呈细胞，它具有强大的T细胞激活能力，并能活化初始型T细胞、刺激B淋巴细胞增殖成熟、刺激Th细胞及NK细胞活性。它不仅能够激活自体的抗肿瘤免疫，同样能够提高异体免疫组织的抗肿瘤效应。基于DC的抗肿瘤免疫治疗已在临床上逐步出现，并以其介导抗肿瘤效应的确实疗效及安全、有效性而为临床工作者称道。但如何进一步增强DC介导肿瘤抗原的特异性一直是人们关注的问题。研究从白血病细胞诱导分化发育而来的DC，利用其细胞本身带有的原始肿瘤细胞的特异性抗原来进一步提高CTL细胞的肿瘤杀伤效应，可以较好的解决这个问题，同时也为白血病的免疫治疗开辟了一个新的方向。 研究内容： 一、白血病细胞来源的DC诱导培养及鉴定 利用髓性白血病(包括慢性粒细胞白血病、急性早幼粒细胞白血病、急性粒、单核细胞白血病)细胞诱导培养DC，观察其光镜、扫描电镜及透射电镜影像，DC的流式检测及免疫组织化学染色确定其特征性免疫表型，做DC染色体检测确定其肿瘤细胞来源，同时检测其分化效率并绘制生长曲线，最后进行DC冻存及解冻的性状对比研究。 二、DC介导的CTL的肿瘤杀伤效应研究 缓解期病人外周血CTL细胞培养、鉴定，DC与CTL、肿瘤细胞共同孵育后，军事医学科学院硕士学位论文加入LDH底物液、显色液，用酶联仪测定57Onm处的光密度值，来检测对肿瘤细胞的杀伤作用。结果: 所做的3例慢性粒细胞白血病(CML)患者的4份标本均观察到典型的DC光镜、扫描电镜及透射电镜影像，流式检测及免疫组织化学染色确定为DC特征性免疫表型，做Dc染色体检测确定为CML细胞来源，DC冻存后再次解冻，其形态、性状、活性基本没有改变。另外所作的2例A毗讯3、AML一麒细胞也均培养出了典型的DC。杀伤试验结果表明肿瘤细胞来源的DC能明确提高CTL细胞的肿瘤杀伤效应，并且随着DC加入比例的增加，其提高的CTL细胞的肿瘤杀伤效应也越强，统计学分析也充分证明了这一点。结论: 1.白血病细胞在多种细胞因子的作用下可以向DC转化。 2.白血病细胞来源的DC保留了其原始肿瘤细胞的特异性肿瘤抗原。 3.DC冻存对其形态、性状、活性改变不大，便于今后临床批量生产、使用。 4.白血病细胞来源的DC能够明确增强自体CTL细胞的肿瘤杀伤效应，且DC 数量与刺激作用有明确的正相关关系。