【摘 要】
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由胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起的炭疽病是芒果上最重要的病害之一。本文测定了20152018年间采集自不同地区的芒果炭疽病菌对咪鲜胺的EC50,分析其对咪鲜胺的抗药性发生情况,测定并分析了野生型与抗性突变体的CYP51基因序列,以及在药剂胁迫下两者甾醇生物合成情况、代谢物差异和细胞膜完整性等生理指标。结果如下:1.通过测定敏感群体223株芒果炭疽病菌
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由胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起的炭疽病是芒果上最重要的病害之一。本文测定了20152018年间采集自不同地区的芒果炭疽病菌对咪鲜胺的EC50,分析其对咪鲜胺的抗药性发生情况,测定并分析了野生型与抗性突变体的CYP51基因序列,以及在药剂胁迫下两者甾醇生物合成情况、代谢物差异和细胞膜完整性等生理指标。结果如下:1.通过测定敏感群体223株芒果炭疽病菌对咪鲜胺的平均EC50值,得到其对咪鲜胺的敏感性基线为0.1572±0.1040μg/m L。以各菌株的EC50值与敏感性基线的比值计算其抗性指数评价其抗性水平:总计242个芒果炭疽病菌菌株中,敏感群体（S）有223株,抗性群体（R）有19株,其中抗性群体中3株为低抗（LR）,6株为中抗（MR）,10株为高抗（HR）,总体抗性频率为7.85%。2.通过紫外诱导和药剂驯化的方式获得4个高抗突变体:16GXBS96-3R,16GXBS87-1R,15GXBS18R,16GXBS71-3R。通过PCR扩增从分别从野生型以及抗性突变体获得长度为1720bp的CYP51目的基因。结果发现,抗性突变体16GXBS87-1R的CYP51基因第114位G碱基突变为A,该突变位点的编码氨基酸由缬氨酸（Val）变为异亮氨酸（Ile）。抗性突变体比野生型编码了更多非极性氨基酸,使其CYP51酶的疏水性增强,导致对咪鲜胺表现出抗性。3.经LCMS法测定野生型16GXBS87-1和抗性突变体16GXBS87-1R菌丝内麦角甾醇含量和代谢物,发现随着咪鲜胺药剂浓度增高,16GXBS87-1菌丝内麦角甾醇含量降低,16GXBS87-1R菌丝内麦角甾醇含量增高,两菌株产生的代谢产物的种类降低。通过测定菌株16GXBS87-1和16GXBS87-1R菌丝的电导率,发现随着药剂浓度增高,16GXBS87-1菌丝电导率升高,16GXBS87-1R菌丝的电导率下降。
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