研究背景：肾细胞癌是一种治疗非常困难的恶性肿瘤。传统的治疗手段如手术治疗，放射治疗和化学治疗等，虽然已经取得了一定的成就，但由于副作用大，并且常常不能够有效根治肿瘤。近年来，虽然又有很多先进治疗手段的出现，但是几乎所有的肾细胞癌患者治疗时还会有治疗抵抗的现象。并且对于已经有转移的晚期肾细胞癌患者，完全治愈几乎是不可能的。Stat3是近年来肿瘤基因治疗中一个研究非常热门的基因。研究发现，Stat3在很多种肿瘤中持续激活，包括肾细胞癌。Stat3在促进肿瘤生长，抑制肿瘤细胞凋亡和促进肿瘤血管生成中发挥着至关重要的作用。因此，本研究使用RNA干涉技术特异性阻断Stat3的表达，在体内外观察对人肾细胞癌细胞系786-O细胞增殖、凋亡和血管生成的作用。目的：本研究在体内外观察质粒pSi-Stat3（以质粒为载体的Stat3小干扰RNA）对人肾细胞癌细胞系786-O细胞的增殖，凋亡和血管生成的作用。方法：本研究首先构建pSi-Stat3质粒。在体外，本实验应用实时定量RT-PCR和Western blot方法观察在肾细胞癌786-O细胞中转染质粒pSi-Stat3后的转染效率以及Stat3基因是否被特异性抑制；分别应用MTT和吖啶橙染色的方法观察转染质粒pSi-Stat3对肾细胞癌786-O增殖和凋亡的影响；分别应用实时定量RT-PCR和Western blot方法检测转染质粒pSi-Stat3后Stat3下游与凋亡相关基因Bcl-2和与血管生成相关的基因VEGF的表达情况。随后本研究又建立了裸鼠786-O细胞的肾细胞癌移植瘤模型，通过肿瘤体积测量，肿瘤大小照相，统计学计算等方法观察抑制Stat3是否能够具有显著抑制肾细胞癌移植瘤生长的作用；并分别使用RT-PCR和Western blot的方法检测治疗后Stat3的表达情况；应用免疫组化检测治疗后增殖特异性标记物Ki-67的表达；应用TUNEL方法检测治疗后肿瘤细胞的凋亡情况；分别应用实时定量RT-PCR和Western blot方法检测肿瘤中Stat3下游与凋亡相关基因Bcl-2和与血管生成相关基因VEGF的表达情况。结果：在体外实验中，实时定量RT-PCR和Western blot结果显示，在786-O细胞中转染质粒pSi-Stat3后，Stat3的表达被特异性阻断； MTT和吖啶橙染色的结果显示，转染质粒pSi-Stat3特异性阻断Stat3表达能够明显抑制细胞增殖与诱导肿瘤细胞凋亡（P <0.01）。实时定量RT-PCR和Western blot结果显示，转染pSi-Stat3质粒能够明显抑制Stat3下游基因Bcl2与VEGF的表达(P <0.05)。用质粒pSi-Stat3进行786-O肾细胞癌移植瘤局部注射治疗显示出显著抑制肾细胞癌移植瘤生长的作用。实时定量RT-PCR和Western blot结果显示，干扰Stat3的基因治疗方法能够特异性阻断肿瘤细胞中Stat3的表达；免疫组化检测治疗后增殖特异性标记物Ki-67的表达结果显示，干扰Stat3的基因治疗方法能够显著抑制Ki-67的表达，抑制肾细胞癌移植瘤的增殖；TUNEL方法检测治疗后肿瘤细胞的凋亡情况的结果显示，干扰Stat3的基因治疗方法能够显著诱导肾细胞癌移植瘤的凋亡；实时定量RT-PCR和Western blot方法检测肿瘤中凋亡相关基因Bcl-2和血管生成相关基因VEGF表达情况的结果显示，干扰Stat3的基因治疗方法能够显著抑制Bcl2与VEGF的表达(P <0.05)。结论：本研究结果显示，以DNA为载体的Stat3特异小干扰RNA能抑制肾细胞癌786-O细胞的增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，并且可能能够抑制肿瘤的血管生成。希望本研究的治疗方法能够对肾细胞癌和其他恶性肿瘤提供一种可行的治疗策略。