枯草芽孢杆菌优良菌株的筛选及其对肉鸡生长性能和部分生化及免疫学指标影响的研究

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微生态制剂在临床中应用多年,尤其以枯草芽孢杆菌作为代表的益生菌得到更加广泛的应用,并且在临床中也取得较好的效果。本论文以通过生化反应鉴定的来自于土壤的疑似枯草芽孢杆菌为研究对象,运用分子生物学方法进一步鉴定筛选出枯草芽孢杆菌,通过生物学特性的研究和小鼠安全性评价,将筛选出的菌株用于肉鸡生产,通过测定肉鸡生长性能、肠道菌群数量变化以及对部分生化、免疫指标的影响,为后期微生态制剂的开发和利用奠定一定的基础。具体结果如下:1、应用基于16S rRNA的PCR鉴定方法、扩增片段序列测定及同源性分析确定10株疑似枯草芽孢杆菌中仅有Q04、Q05和Q093株为枯草芽孢杆菌。2、三株枯草芽孢杆菌经过耐酸、耐胆汁、耐高温以及抗菌药物敏感性试验结果显示:Q04与其他2株枯草芽孢杆菌相比较在pH2.5,胆盐浓度0.20%以及100℃时耐受能力良好。3、Q04培养后分别以1.0×109CFU/mL的活菌浓度腹腔注射和口服人工感染小鼠,结果显示感染小鼠均健康存活,体重增加,且小鼠脏器无病变,脏器系数无显著差异(P>0.05);4、将Q04分别按活菌数量3.0×109CFU/g(试验组A)、5.0×109CFU/g(试验组B)、8.0×109CFU/g(试验组C)添加于饲料,同时以不添加枯草芽孢杆菌饲料饲喂肉鸡作为对照(对照组D)。(1)15日龄时,试验组B肉鸡的平均体重显著高于对照组D(P<0.05),30日龄时,肉鸡平均重量显著高于对照组D(P<0.05);试验结束时,各试验组与对照组之间的平均总增重和平均日增重均没有显著差异(P>0.05),而试验组B的料肉比显著低于对照组D(P<0.05)。(2)肉鸡试验组与对照组比较,各时间段肉鸡血清中钙(Ca)、白蛋白、CD4+、CD8+以及IgM的平均含量无显著差异(P>0.05);(3)肉鸡血清中无机磷(P)含量在30日龄时,试验组A的无机磷含量显著高于对照组D(P<0.05);15日龄时肉鸡血清中总蛋白含量试验组B显著高于对照组D(P<0.05),30日龄时,试验组A、试验组B以及试验组C的血清总蛋白含量均显著高于对照组D(P<0.05),45日龄时试验组A显著高于对照组(P<0.05),60日龄时试验组B显著高于对照组(P<0.05);在肉鸡15日龄、30日龄、45日龄以及60日龄时,试验组B和试验组C甘油三酯平均含量显著低于对照组D(P<0.05);肉鸡30日龄、45日龄以及60日龄时,试验组A甘油三酯平均含量显著低于对照组D(P<0.05)(4)肉鸡15日龄和30日龄时,试验组A和C的IgA和IgG含量显著高于对照组D(P<0.05);45日龄时试验组A的IgG含量显著高于对照组D(P<0.05)
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