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目的:研究丰富环境及叶酸对母婴分离模型小鼠行为学影响及机制。方法:新生小鼠100只,分为对照组、模型组、丰富环境组和叶酸组。对照组不进行操作;模型组、丰富环境组和叶酸组都给予母婴分离每日4h持续28d,分离14d时,同时除对照组外的各组小鼠进行持续28d的处理,处理如下:模型组腹腔注射与叶酸等体积的生理盐水,丰富环境组每日4h的丰富环境,叶酸组每日一次腹腔注射叶酸(5mg/kg)。10周龄时,通过十字高架实验、旷场实验、新事物识别实验、强迫游泳实验研究丰富环境及叶酸对母婴分离模型小鼠行为学影响,同时监测体重变化。待小鼠完成行为学测试后,取海马、前额皮层及血清,用qPCR法检测海马、前额皮层中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)、盐皮质激素受体(mineralocorticoid receptor,MR)、11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-hydroxysteroid dehydrogenase 1,11β-HSD1)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、皮质酮(corticosterone,CORT)的mRNA水平变化;ELISA法测定各组小鼠海马和血清中促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、CORT、及海马和前额皮层中5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5-mC)、5-羟甲基胞嘧啶(hydroxymethylcytosine,5-hmC)水平;Western-Blot法检测海马和前额皮层中GR、MR、11β-HSD1、BDNF的蛋白表达水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠体重先升高后降低(p<0.05),丰富环境组和叶酸组的小鼠体重明显降低(p<0.05)。在十字高架实验中,给予丰富环境可增加模型组小鼠十字高架内的活动(p<0.05或p<0.001);给予叶酸只能增加小鼠滞留的开臂时间(p<0.001),其余无统计学意义(p>0.05);在旷场实验中,给予丰富环境可增加模型组小鼠旷场内的活动(p<0.05或p<0.001),给予叶酸仅使小鼠进入旷场中心的时间增多(p<0.001),其它活动无统计学意义(p>0.05);在强迫游泳实验中,模型组小鼠不动时间延长(p<0.01),给予丰富环境或叶酸均能显著缩短模型组小鼠不动时间(p<0.01或p<0.001);在新事物识别实验中,给予丰富环境或叶酸均能提升模型组小鼠识别新事物的百分比(p<0.01或p<0.001)。qPCR结果显示,给予丰富环境或叶酸增加模型组小鼠海马和前额皮层中GR、MR、BDNF的mRNA的表达(p<0.05或p<0.01)以及降低CORT mRNA的表达(p<0.05或p<0.01或p<0.001)。给予丰富环境或叶酸可增加模型组小鼠海马中11β-HSD1 mRNA的表达(p<0.05或p<0.001),以及降低模型组小鼠前额皮层中11β-HSD1 mRNA的表达(p<0.001或p<0.01)。ELISA结果显示,给予丰富环境或叶酸可降低模型组海马中CRH、ACTH、CORT的含量(p<0.05或p<0.01或p<0.001);在血清中,各组小鼠海马中ACTH含量降低(p<0.001或p<0.05或p<0.01),给予丰富环境可降低模型组小鼠血清中CRH、CORT(p<0.05或p<0.001),给予叶酸只能降低模型组小鼠血清中CORT的含量(p<0.01)。给予丰富环境或叶酸可提高模型组小鼠海马中5-mC含量(p<0.001或p<0.05),以及降低模型组小鼠海马中5-hmC含量(p<0.05)。但在前额皮层中,只有丰富环境组小鼠前额皮层中的5-mC含量升高(p<0.01)、叶酸组5-hmC含量降低(p<0.001),其余均无统计学意义。Western-Blot结果显示,给予丰富环境或叶酸可提升模型组小鼠海马中GR、11β-HSD1、BDNF蛋白表达(p<0.05或p<0.01),各组小鼠海马中MR蛋白表达无差异(p>0.05);与对照组相比,模型组GR/MR比值在海马和前额皮层中降低(p<0.01),丰富环境组和叶酸组的GR/MR比值只在海马中增加(p<0.05),在前额皮层中无统计学意义(p>0.05)。给予丰富环境或叶酸可提高模型组小鼠前额皮层GR、MR、BDNF蛋白表达水平(p<0.05或p<0.01),以及降低前额皮层中11β-HSD1蛋白表达水平(p<0.05或p<0.01,各自的)。结论:给予丰富环境和叶酸可改善模型组小鼠焦虑抑郁样行为、认知功能障碍及体重变化,其机制可能是部分通过改变GR、MR、BDNF、11β-HSD1基因DNA甲基化水平,导致mRNA水平及蛋白表达水平改变,引起HPA轴变化,从而改善小鼠焦虑抑郁样行为,认知功能障碍及体重变化。同时5-mC代表全基因组甲基化状态,5-hmC代表全基因组去甲基化态,所以丰富环境和叶酸也可能通过调节DNA甲基化和DNA去甲基化动态平衡来发挥作用。但丰富环境改善效果优于叶酸,可能丰富环境除了改变DNA甲基化水平外还存在其他作用机制。