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背景对映体是指在空间上不能重叠、互为镜像关系的一对立体异构体,就像人的左右手,称之为具有手性。手性药物的两个对映体往往在生物体内的药理活性、代谢过程都存在显著的差异。氨甲蝶呤(methotrexate, MTX)为手性对映体分子,存在L-MTX、D-MTX两种单体构型。它在肿瘤治疗中是最广泛应用的抗叶酸制剂,对白血病、淋巴瘤、成骨肉瘤、绒毛膜癌等疗效确切。但是如何克服患者对MTX获得性耐药仍然是个难题。临床使用的MTX制剂多是两种对映体的混合物,其比例可能会对疗效以及耐药性强弱产生一定影响。根据对映体药物特性以及本课题组体外实验结果,认为L型和D型MTX在参与肿瘤细胞获得性耐药过程中起着不同作用。因此本实验旨在建立对MTX两种对映体耐药的裸鼠肿瘤模型,分析生物体内肿瘤生长及耐药特性,为揭示其不同耐药机制提供良好的实验平台。目的利用L型和D型MTX对映体分别建立人肺腺癌A549细胞株裸鼠耐药模型,为进一步揭示MTX对映体体内活性差异的原因提供实验平台。方法①裸鼠皮下分别接种A549亲本细胞株、耐药细胞株A549/L-MTX、A549/D-MTX各6×106个/0.2ml,观察肿瘤生长特性;②瘤体原代培养后四甲基偶氮唑兰(MTT)法检测耐药指数( resistance index RI);③免疫组化(IHC)、逆转录-聚合酶链反应(RT- PCR)法检测ki-67、MRP1、survivin变化。结果①从肿瘤生长曲线上看瘤体积3组间均有差异( P均<0.05),A549/L-MTX/nude组体积最小。②A549/L-MTX/nude移植瘤RI为4.9,为低度耐药,A549/D-MTX/nude移植瘤RI为14.5,为中度耐药。③裸鼠RT- PCR及IHC检测发现耐药组相关基因和蛋白总体表达降低,ki-67、MRP1、survivin组L型和/或D型耐药细胞与亲本细胞均有差异(P均<0.05),尤以L型差异更为明显。结论成功建立对MTX两种对映体耐药的A549细胞株裸鼠肿瘤模型,且两种耐药细胞对L-MTX和D-MTX具有不同耐药特性,为研究MTX对映体体内抗肿瘤活性差异提供了较好的实验平台。