复合维生素B片中5种成分的定量毛细管电泳分析研究

来源 :上海应用技术大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LanceXulei
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毛细管电泳因其较高的分离效能、消耗较少的样品以及简单的仪器结构等特点,在包括医学、药学、环境及食品等领域有着广泛应用。但毛细管电泳的峰面积重复性相对偏差的问题限制了它在定量分析方面的应用。最近开发出的一种高精度定量毛细管电泳仪针对这个问题,使用定量阀和自动进样器提高了进样精度。本课题使用这种定量毛细管电泳仪,建立了复合维生素B片中维生素B1(硫胺素)、B2(核黄素)、B6(吡哆辛)、烟酰胺和泛酸钙5种维生素成分的分离分析方法,显著改善了定量重复性。还对这种定量毛细管电泳中的电隔离装置进行了研究,提出一种无需缓冲液池的电隔离装置。使用定量毛细管电泳仪,在考察实验条件影响的基础上,建立了复合维生素B片中维生素B1、B2、B6、烟酰胺和泛酸钙5种维生素成分的毛细管电泳分离分析方法,并做了方法学评价。复合维生素B片样品研粉后用乙腈-水(20:80,v/v)超声提取,经过0.22μm微孔滤膜过滤后,毛细管电泳仪进样分析,实验中微流注射泵连续供给40 mmol/L硼砂-硼酸缓冲液(pH 9.0),以工作电压为-10 kV进行电泳分离,维生素B1、B2、B6、烟酰胺的检测波长为280 nm,这4个组分出峰后切换至波长210 nm检测泛酸钙。实验显示,各组分之间均得到良好分离,日内精密度实验的相对标准偏差(RSD)为1.3%-1.9%,与经典毛细管电泳相比精密度得到显著改善。维生素B1、B2、B6、烟酰胺及泛酸钙的浓度在0.02-16.46mg/mL范围内,峰面积对浓度的线性相关系数(r)在0.9968-9998内。各组分检出限在2.5-36μg/mL。各组分的样品平均回收率为94.1%-98.9%。该法简便快速,准确可靠,可用于复合维生素B片中维生素B1、B2、B6、烟酰胺和泛酸钙含量的同时测定。本论文还提出了一种用于定量毛细管电泳分析的毛细管电接口装置,包括支架、亲水薄膜、导电胶、弹性石英毛细管、固定玻片。将毛细管断开再对齐,在断缝处覆盖亲水多孔的醋酸纤维素膜后,用导电胶覆盖,以支架和固定玻片固定毛细管,通过导电胶与电极连接。该装置制作方法简单、使用稳定,避免了使用缓冲溶液池的麻烦。已用于定量毛细管电泳分离胞嘧啶、尿嘧啶和腺苷样品。
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