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本文从以下几个部分展开论述： 一、LncRNA-MEG3在视网膜母细胞瘤中的表达 目的：检测lncRNA-MEG3在视网膜母细胞瘤组织及细胞中的表达。 方法：qRT-PCR检测21例视网膜母细胞瘤组织与瘤旁正常组织、视网膜母细胞瘤细胞(Weri-Rb1、Y79)与正常视网膜色素上皮细胞(hTERT RPE-1)中lncRNA-MEG3的表达。 结果：视网膜母细胞瘤组织中lncRNA-MEG3的表达显著低于瘤旁正常组织，Weri-Rb1、Y79细胞中lncRNA-MEG3的表达显著低于hTERT RPE-1细胞。 结论：LncRNA-MEG3在视网膜母细胞瘤组织及细胞中均为低表达。 二、LncRNA-MEG3对视网膜母细胞瘤细胞功能的影响 目的：检测Weri-Rb1、Y79细胞中lncRNA-MEG3表达量对细胞功能的影响。 方法：用pcDNA-MEG3或si-MEG3转染Weri-Rb1或Y79细胞后，CCK-8实验及流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡能力。 结果：转染pcDNA-MEG3的Weri-Rb1细胞增殖显著减弱，凋亡显著增加;转染si-MEG3的Y79细胞增殖显著增强，凋亡显著降低。 结论：LncRNA-MEG3在视网膜母细胞瘤中发挥抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。 三、视网膜母细胞瘤细胞MEG3基因启动子DNA甲基化状态对lncRNA-MEG3表达及细胞功能的影响 目的：检测视网膜母细胞瘤组织及细胞MEG3基因启动子DNA甲基化状态，探讨其与lncRNA-MEG3表达量及细胞功能之间的关系。 方法：MS-PCR检测21例视网膜母细胞瘤组织、瘤旁正常组织、Weri-Rb1、Y79细胞MEG3基因启动子DNA甲基化状态及lncRNA-MEG3表达量。5-Aza-CdR处理细胞后，检测lncRNA-MEG3表达量、细胞增殖及凋亡能力。5-Aza-CdR和siRNA-MEG3共同干预后，检测细胞增殖、凋亡能力。 结果：视网膜母细胞瘤组织中MEG3基因启动子DNA处于甲基化状态的比例显著高于瘤旁正常组织，甲基化组lncRNA-MEG3表达量显著低于部分甲基化组及非甲基化组;Weri-Rb1、Y79细胞MEG3基因启动子DNA处于甲基化状态;用5-Aza-CdR处理后，lncRNA-MEG3表达量显著增高，细胞增殖显著减弱，凋亡显著增加;经5-Aza-CdR和si-MEG3共同干预后，5-Aza-CdR抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的能力均被逆转。 结论：LncRNA-MEG3在视网膜母细胞瘤中低表达与MEG3基因启动子DNA过甲基化有关。 四、LncRNA-MEG3在视网膜母细胞瘤中对Wnt/β-catenin信号通路活性的调控 目的：探讨在视网膜母细胞瘤中lncRNA-MEG3是否可通过调节Wnt/β-catenin信号通路活性而发挥作用。 方法：用pcDNA-MEG3或si-MEG3转染Weri-Rb1、Y79细胞后，用TOP-Flash reporter实验检测Wnt/β-catenin信号通路活性，Western blot实验检测β-catenin蛋白表达量;Wnt/β-catenin信号通路激活剂或拮抗剂与pcDNA-MEG3或si-MEG3共同转染Weri-Rb1、Y79细胞后，检测β-catenin蛋白表达量、细胞增殖及凋亡能力。 结果：转染peDNA-MEG3的Weri-Rb1细胞，荧光素酶活性、β-catenin蛋白表达量均显著降低;转染si-MEG3的Y79细胞，荧光素酶活性、β-catenin蛋白表达量均显著增强;激活Wnt/β-catenin信号通路活性后，pcDNA-MEG3对Weri-Rb1细胞的抑癌作用被逆转;抑制Wnt/β-catenin信号通路活性后，si-MEG3对Y79细胞的促癌作用被逆转。 结论：LncRNA-MEG3在视网膜母细胞瘤中可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活性而发挥作用。