复方黄根颗粒的制备工艺及质量标准研究

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目的:优化复方黄根颗粒的制备工艺,建立复方黄根颗粒含量测定方法,研究复方黄根拆方对四氯化碳所致大鼠肝纤维化的影响,为复方黄根颗粒提供实验研究基础。方法:(1)提取工艺:以总蒽醌、齐墩果酸提取量的加权总评归一值(OD值)为指标,采用正交试验法,对乙醇浓度、固液比、提取时间、提取次数进行考察,优选黄根、三姐妹的醇提工艺;以人参皂苷rb1的提取量与干膏率的加权总评归一值(OD值)为指标,采用正交试验法,对加水量、提取时间、提取次数进行考察,优选绞股蓝、叶下珠、白术、黄芪、三七五味药的水提工艺,并优选了复方黄根的醇沉密度、含醇量和醇沉时间。(2)制剂成型工艺:采用湿法制粒,对乙醇浓度、粒度、吸湿性、溶化性、助悬剂、矫味剂进行了考察,优选出最佳制备工艺。(3)质量标准研究:采用薄层色谱法对复方黄根颗粒中的黄根、三姐妹、三七进行定性鉴别;采用HPLC法对复方黄根中的有效成分甲基异茜草素和毛蕊异黄酮进行含量测定研究。(4)拆方及工艺筛选研究:以肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、PCⅢ与肝脏中SOD、GSH-PX、GSH的活性为指标,研究复方黄根是否具有抗肝纤维化作用。结果:(1)复方黄根颗粒最佳醇提工艺参数为加8倍的60%乙醇提取2次,每次2小时;最佳水提工艺为加10倍的水提取2次,每次2小时;最佳醇沉工艺参数为浓缩液浓缩至相对密度为1.10,放冷,加乙醇至含醇量达60%,静置24h。(2)复方黄根颗粒最佳成型工艺为将一日剂量的药材干粉加辅料糊精与甜菊素混合均匀,共45g,加入浓度为85%乙醇制软材,迅速过14目筛制粒,干燥分装即得。(3)建立复方黄根颗粒中黄根、三姐妹、三七三味药材的薄层鉴别方法,供试品色谱与对照药材或对照品在相同位置有相同颜色斑点,分离良好,斑点清晰,阴性无干扰。建立了复方黄根颗粒中甲基异茜草素和毛蕊异黄酮的含量测定方法,制定了复方黄根颗粒中甲基异茜草素和毛蕊异黄酮的含量限度,甲基异茜草素的含量不得低于0.0155mg/g,毛蕊异黄酮的含量不得低于0.134mg/g。(4)拆方实验结果表明,加入醇提黄根与三姐妹的改良工艺高剂量组治疗效果最佳,可显著降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST、PCⅢ的水平,提高肝纤维化大鼠肝脏中SOD、GSH-PX、GSH的活性,降低HYP的活性,具有良好的抗肝纤维化作用。结论:优化了复方黄根的制备工艺,确立了复方黄根颗粒君药黄根的含量测定方法,研究了改良后的复方黄根颗粒更具有抗肝纤维化的作用。为复方黄根颗粒的进一步开发提供理论依据。
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