KCTD10基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中的功能研究

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KCTD10(potassium channel tetramerisation domain containing10)是属于PDIP1基因家族的一个钾离子四聚体通道蛋白,PDIP1基因家族的成员在蛋白结构上高度相似,在N端区域,都有一个钾离子四聚体通道结构域(K-tetra)和BTB/POZ结构域。而在C端有保守的PCNA结合位点。KCTD10可同时和PCNA以及DNA聚合酶6的小亚基P50相互作用,并且受肿瘤坏死因子TNF-α诱导。斑马鱼KCTD10基因cDNA全长3716bp,开放式阅读框(open reading frame ORF)长942bp,该基因的ORF编码的多肽由313个氨基酸残基构成。KCTD10基因在进化上高度保守,并在人、牛、小家鼠、鸡、非洲蟾蜍及斑马鱼等中编码一个高度保守的蛋白质。为了进一步研究KCTD10在动物发育过程中的功能,本研究以斑马鱼为模式动物,探索了KCTD10在斑马鱼中的时空表达模式以及通过合成特异性的KCTD10Morpholinos寡核苷酸抑制KCTD10基因的表达后对斑马鱼胚胎早期发育的影响。结果显示,KCTD10在斑马鱼早期发育不同阶段及斑马鱼成体不同的组织器官中均有表达,而且在脑、心脏、肝脏、鳃、鳍和生殖细胞等器官表达较高。MO下调KCTD10基因的表达后,斑马鱼的心血管和骨骼肌的发育显示出严重的异常表型:线性化的心脏、发育不全的脑部、微弱的血液循环、血液滞留、心跳减缓、躯干弯曲,部分表型严重的在5天内死亡。而注射相同剂量的对照MO的胚胎发育与野生型胚胎没有明显区别。通过对斑马鱼心脏标记基因amhc、vmhc和cmlc2,以及血管的标记基因nk-1的原位分析显示,MO抑制KCTD10基因表达的胚胎中,标记基因amhc、vmhc、cmlc2、flk-1的表达均受到不同程度的影响。这些结果表明斑马鱼KCTD10基因在启动胚胎发育和其后的组织器官发生如脑、心脏和血管等组织中都有重要的作用。
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