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石房蛤毒素(STX)是一种海洋麻痹性贝类毒素,主要来源于有毒的藻类。贝类通过食用有毒藻类,蓄积在其体内形成STX。STX毒性极强,对人类的致死量约为1 mg,中毒症状明显,轻则引发腹泻,重则引起休克致死。近年来,常发生由于误食有毒贝类而引起中毒的事件。因此,研究出一种快速、灵敏的现场检测方法,实现对STX的有效监控具有重要意义。与STX其他常用的检测方法相比,试纸条具有以下几个特点:对复杂样品进行简单预处理,试验结果直观,肉眼可见,且检测时间短,仪器设备小型化方便携带等。本文主要是构建基于核酸适配体的纳米金试纸条生物传感器,采用竞争法的识别机理,实现对石房蛤毒素的高灵敏度的快速检测,并将其应用到贝类产品毒素的检测。本论文的主要内容包括:(1)制备核酸适配体—纳米金复合材料,构建基于核酸适配体的STX纳米金试纸条,确定了 STX检测最优条件:缓冲液为Tris-Hcl 0.01 mol/L + Nacl 0.6 mol/L + 2%BSA,结合垫上的 GNPs-DNA probe 1(Conjugate)复合物的量为2 μL,Conjugate复合物中核酸适配体的量为2 OD,喷涂在NC膜上检测线位置STX的DNA probe 2的浓度为1μg/mL,在此条件下,信噪比最佳。(2)进一步对核酸适配体纳米金试纸条的灵敏度、重现性、特异性和稳定性进行研究。结果显示:试纸条在10～1000ng/mL范围内有良好的线性关系,y=-269.79x+ 1011.93,R2=0.99035,试纸条最低检测限可达到1.3 ng/mL,且该试纸条对于其他非目标毒素(如:大田软海绵酸、黄曲霉毒素、河豚毒素等)并物明显的响应信号的变化,展现了其良好的特异性。对0ng/mL、10ng/mL、200 ng/mL、800 ng/mL STX四个水平分别进行6次重复实验,计算得其相对标准偏差分别为21%、3%、15%和19%,说明该试纸条具有良好的重复性,且在室温条件下8周内保持良好的稳定性。该核酸适配体纳米金试纸条生物传感器具有良好的分析性能,为实现对STX的快速检测提供一个快捷、简便的检测手段。(3)在实际贝类样品的检测中,试纸条响应信号的强度与复杂基质中的目标毒素浓度在0～1000 ng/mL范围内有良好的线性关系,检测限可达到2.54 ng/mL,其结果与标准品的检测结果相一致,说明该试纸条在复杂基质的环境中对目标毒素可保持良好的选择性,不易受其干扰。同时,将试纸条对实际贝类样品的检测结果与传统的小鼠生物法检测结果进行对比,表现出较好的一致性。