滋肾活血颗粒干预大鼠肾纤维化模型中TGF-β1、CTGF表达的实验研究

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目的:通过观察大中小剂量滋肾活血颗粒对肾纤维化模型大鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达水平及其相关性的研究,进一步探讨滋肾活血颗粒早期干预肾纤维化进程的作用机制,为中医药防治肾纤维化的临床实践提供更多的思路及方法。同时也为滋肾活血颗粒防治肾纤维化的中药剂量量化提供依据。  方法:健康普通级SD大鼠72只,雌雄各半,随机抽取60只,采用单侧肾脏切除加两次尾静脉注射阿霉素注射液(ADR)的方法建立肾纤维化大鼠模型。设立空白组、模型组、滋肾活血颗粒大剂量组、滋肾活血颗粒中剂量组、滋肾活血颗粒小剂量组、卡托普利西药组,共分为六组。各组予正常饮食进水,并于造模后(第二次尾静脉注射阿霉素注射液后)开始,中药各组、西药组分别给予相应药物灌胃治疗8周,模型组同时予等量生理盐水灌胃。于第8周末收集24h尿液行尿蛋白定量(24hUpro)检测后,处死大鼠,腹主动脉取血检测各组大鼠的血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr);取左肾组织免疫组化检测TGF-β1、CTGF的表达。  结果:1、模型组大鼠的24hUpro、Cr、BUN水平均较空白组明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。2、滋肾活血颗粒大中剂量治疗组、西药组上述指标较模型组和滋肾活血颗粒小剂量治疗组均有不同程度的改善,差异有统计学意义(P<0.01);滋肾活血颗粒大中剂量治疗组与西药组比较也具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。而滋肾活血颗粒小剂量治疗组和模型组比较则无显著性差异(P>0.05),滋肾活血颗粒大中剂量治疗组比较无统计学差异(P>0.05)。3、免疫组化实验结果显示:空白组大鼠肾组织中 TGF-β1、CTGF略表达,模型组、滋肾活血颗粒小剂量治疗组大鼠则表达明显增加,与空白组比较具有显著性差异(P<0.01);滋肾活血颗粒大中剂量治疗组、西药治疗组 TGF-β1、CTGF表达较模型组和中药小剂量组明显减少,与其比较具有显著性差异(P<0.01),滋肾活血颗粒大中剂量治疗组比较则无明显差异(P>0.05)。  结论:1、滋肾活血颗粒大中剂量组可有效降低阿霉素肾病肾纤维化大鼠24hUPro、Bun和Cr的水平,具有保护肾功能的作用。2、滋肾活血颗粒大中剂量组能够抑制肾组织TGF-β1、CTGF的表达,从而使病变肾组织ECM合成减少。提示该方作用机制在于抑制TGF-β1、CTGF表达,减轻肾脏细胞增生及细胞外基质积聚等肾脏病理损伤,从而有效延缓肾纤维化的进程。3、肾组织TGF-β1、CTGF表达有相关性,可认为作为TGF-β1的下游因子CTGF在肾纤维化发挥促纤维化作用,从而为中药防治肾纤维化提供思路和方法。4、在抗肾纤维化治疗过程中,滋肾活血颗粒大中剂量组疗效优于小剂量组,同时大中剂量组之间疗效相当。
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