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目的:肝癌是迅速发展致死的一种恶性肿瘤,我国是世界上肝癌发病率最高的国家之一。近年来随着影像诊断学的发展,一些重要的诊断手段如B超、CT、AFP等肿瘤标记物引入临床应用,早期肝癌的诊断率得到提高。人端粒酶逆转录酶作为端粒酶的限速酶,具有肿瘤特异性,已成为肿瘤治疗和诊断的重要靶点。本课题应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测HCC(hepatocellularcarcinoma)患者肝细胞性肝癌组织中端粒酶逆转录酶mRNA(hTERTmRNA)的表达,探讨hTERTmRNA在肝细胞性肝癌组织中的表达及其临床意义。
方法:在肝癌手术切除17例标本中分别切取10g肝癌组织,液氮冻存。以肝癌细胞株BEL7405为阳性对照,以3例肝囊肿切除边缘部分正常肝组织为阴性对照。按一步法应用TaKaRaRNAisoReagent提取总RNA,紫外分光光度计确定核酸纯度,并定量。采取两步法RT-PCR检测hTERTmRNA的表达水平,选用三磷酸甘油醛脱氢酶(humanglyceraldehydes-3-phoshatedehydrogenase,hGAPDH)基因作为原始序列的内参照,分析hTERTmRNA在肝癌中的表达及其临床意义。
结果:hTERTmRNA基因在肝癌细胞株BEL7405及82.35%的肝细胞性肝癌组织中表达,正常肝组织内未检测到hTERTmRNA。肝细胞性肝癌组织hTERTmRNA表达明显高于正常肝组织。肝癌组织、肝癌细胞株与正常肝组织GAPDH表达无差异。hTERTmRNA表达水平与性别、肿瘤直径、肿瘤数目和血清AFP水平无关,与门静脉侵犯相关。
结论:hTERTmRNA在肝细胞性肝癌中高表达,正常肝组织中无表达。hTERTmRNA基因的表达与性别、肿瘤直径、肿瘤数目和血清AFP水平无关,与门静脉侵犯相关。hTERTmRNA检测有可能成为预测肝癌预后的特异性指标。