表达新城疫病毒F<,48>E<,8>株融合蛋白基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力检测

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:beiwei72
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
新城疫(ND)是对养禽业危害最大的病毒性传染病之一,而新城疫病毒(NDV)F48E8株则是中国的标准强毒。为了研制有效的ND基因工程疫苗,本实验构建了表达NDV F48E8株融合蛋白(F蛋白)基因的重组鸡痘病毒(rFPV),并测定了rFPV的免疫效力,为NDV基因工程苗今后的开发提供了试验基础。现将本实验所做的工作从两个方面概述如下: 1.从含有NDV F48E8 F基因的质粒PE1/E2-3,运用PCR法扩增的F基因,并将基因定向克隆到转移载体pEFgpt12S的Ecogpt基因下游,构建成转移载体pEF-2。以磷酸钙转染的方法转染含有F基因的重组鸡痘病毒rFPVNDF感染的鸡胚成纤维细胞,经有限稀释法挑取病毒蚀斑,;利用MXHAT培养基而进行负性筛选,得到了稳定生长新的重组鸡痘病毒rFPV-2。该重组毒具有两个F基因。间接免疫荧光试验表明,rFPV-2感染的鸡胚成纤维细胞中表达了NDV的F基因,与rFPVNDF相比,荧光数目更多,表明F蛋白的表达量更大。 2.评价了重组毒rFPV-2、rFPVNDF的免疫效力。在用SPF鸡进行的一次免疫效力试验中,9日龄的试验鸡接种rFPV-2和rFPVNDF后,能产生对大剂量NDV强毒的保护,保护率分别为50%和43%。将rFPV-2和Lasota结合使用保护率和疫苗对照组Lasota相同。从接种rFPV-2和rFPVNDF的试验鸡中检测出了中和抗体。在用用SPF鸡进行的二次免疫效力试验中rFPV-2和rFPVNDF产生的保护率为79%和64%,而rFPV-2和Lasota结合使用保护率超过了对照组Lasota,达到了100%。
其他文献
通过SPF鸡胚连续、快速传代,从自然发病鸡脑组织中分离出一株禽脑脊髓炎病毒(定名为HN株),该病毒对盐酸、氯仿、胰蛋白酶有抵抗力,在二价镁离子保护下可抵抗热效应50℃,病毒滴度EID
摘要:本文从三个方面论述了新课程改革下的语文课堂教学的特点、方法和做法,旨在使教师的教和学生的学形成共识,形成学生自身的学习规律,把语文课学好。  关键词:新课改 语文 课堂教学 人文特点 观念转变  任何一门学科都有其自身的特点,语文学科也不例外。语文学科的基本特点有三个:人文性、实践性和汉语言文字自身的规律。长期以来,人们对这三个特点并没有达成完整、稳定的共识,顾此失彼的现象时有发生,导致了语
凡是一篇文章,或围绕一个中心写成,或捋着一条线索写成,或围绕着一个意思、一个重点写成。备课时教师就要研究这个中心、线索、重点,并且要吃透它。然后根据你的理解,在教学中提出一个便于学生整体感知、整体把握主要内容的在问题,让学生读书思考。这个问题是一个情境,所以一般情况下不必回答,至少不必马上回答。这个大问题是教师指导学生读书的思路,更是学生自读自悟的思路。  语文阅读教学是具有艺术性的。这种艺术的首
Human cosavirus (HCoSV)属微小核糖核酸病毒科(Picornaviridae),为单股正链RNA病毒。至今,共分离出五个病毒种,分别为A,B,C,D,E (Human cosavirus A-E)。虽然HCoSV与临床症
摘要:本文从教学实践体会与学习他人的教学经验入手,针对以就业为导向的职业高中教育数学文化课的教学要求.提出让学生学到必需的、够用的、有价值的教学知识,立足效果.使得数学教学趋于大众化、贴近专业化、生活化、呈现多样化.为学生就业做好数学方面的准备,从而显著的提高职高数学教学的有效性。  关键词:职高学生 职高数学 分层教学 合作学习就业导向  职业高中与普通高中在数学课教学中有很大的区别。数学课在普