玻璃体细胞病理分析对炎性脉络膜视网膜疾病的诊断价值

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正常玻璃体为由胶原细纤维(collagenfiber)及填充其间的大分子透明质酸(hyaluronicacid)组成高度透明的凝胶体,透明质酸的含水量高达98%。玻璃体本身虽无血管,却是个营养储蓄库,富含多种营养物质,当玻璃体周围组织或其本身发生病变时,玻璃体便成为病原体及细胞的良好培养基。临床上有一类疾病,特征是因视网膜炎(retinitis)或视网膜脉络膜炎(retinochoroiditis),亦或病原体通过外伤伤口、手术刀口直接侵入玻璃体腔,均导致了玻璃体发生炎性病理改变,屈光间质出现不同程度的混浊,从而使临床常用,基于屈光间质透明的检查,如眼底血管造影(fluorescencefundusangiography,FFA),视网膜断层成像(opticalcoherencetomography,OCT)失去辅助诊断意义。因此玻璃体细胞学应运而生,已被证明对临床疑难疾病的辅助及排除诊断有重要意义。我们可以查阅到在肿瘤尤其是淋巴瘤(lymphomas),黑色素瘤(melanoma)等方面的诸多研究文献;同时,在感染炎症方面也有国外文献的记录,像青年性黄色肉芽肿(juvenilexanthogranuloma)等;另外,在晶体或红细胞所致的青光眼(glaucoma),COAT’s病等方面,玻璃体细胞学也被证明是很有价值的辅助检查。目的:临床上,玻璃体细胞学技术因有其特殊性,因此,并未得到广泛的应用,本实验即通过对临床较常见炎性脉络膜视网膜疾病行细胞病理学检查,试图优化现有的玻璃体细胞学方法,总结并建立从标本的取出到实验室检查的规范操作,分析在不同类型的疾病中的应用价值。方法:在实验期间收入院的31例炎性视网膜脉络膜疾病的病人按术前诊断分为以下三个研究组:一组为外伤性脉络膜视网膜疾病(traumaticvitreoretinopathy)21例,包括因球破裂伤(eyeballrupture)入院行缝合术的患者18例,其中14例因玻璃体出血混浊行二次玻璃体切割手术(vitrectomy),另有3例直接以外伤性眼内炎(traumaticendophthalmitis)入院。一组为缺血性中央静阻(center retinal veinocclusion,CRVO)的患者4例。一组为因玻璃体出血(vitreous hemorrhage)混浊无法探其病因的患者6例。眼球破裂伤者直接剪取纯玻璃体,余患者通过标准三切口20-gauge的切割头以800cpm切速切割获取未稀释的玻璃体标本,另外收集无菌集液盒的稀释的标本。标本处理为制作成蜡块或通过以下三种方法涂片:直接涂片,离心重悬后涂片,离心沉淀物周围滤液涂片。对不同类型疾病选择合适的染色方法,所有病例均行苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)基础染色,检验病原体用吖啶橙(acridine orange)和吉姆萨(Giesma)联合染色,疑似黑色素颗粒行Lillie亚铁染色。有多余标本者另行迈格吉(May-Grunwald Giemsa,MGG)染色与HE染色对比效果。最后记录不同类别疾病中观察到的炎性细胞(inflammatorycells)种类。对玻血类标本行SPSS统计检验所观察的炎性细胞是否有意义。结果:1.外伤性脉络膜视网膜疾病组本组21例患者中15例取得首次手术标本,17例取得二次玻切手术标本。其中4例只有首次手术标本,4例只有二次手术标本,13例两次标本均取。第一次取材中有9例可见有充满棕黑色的色素细胞(Retinal pigment epithelium,RPE),1例可见明显增多的多形核粒细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN)和单核细胞(monocyte,Mon),2例可见增多的多形核粒细胞,其他炎性细胞较少。这3例术后发生外伤性眼内炎,发生眼内炎的标本中可见可见满视野的中性粒细胞(neutrophil, Neu),多形核粒细胞,余可见单核细胞、淋巴细胞(lymphocyte,Lym)等炎性细胞,但量较少。第二次取材中,有7例可见弥漫的色素颗粒和充满色素颗粒的细胞及散在的中性粒细胞,单核细胞及淋巴细胞,三者比较无明显优势。有6例术中可见发生外伤性网脱(traumatic retinal detachment,TRD)。发生TRD的标本中可见有大量的充满色素颗粒的RPE,及单核细胞,淋巴细胞,中性粒细胞。2.缺血型CRVO组共4例标本,其中2例患者标本中可见明显的神经胶质细胞(neuroglia cell),余可见明显的Mon及少量的Neu,Lym。3.视网膜分支静阻组(Branch retinal vein occlusion BRVO)和视网膜血管炎(retinal vaseulitis)组这两组共6例患者,以玻璃体积血收入院,均以Lym为主。4. HE染色和MGG染色,两者对比,均能较好的显示细胞,但MGG染色步骤少,检验快速;HE染色步骤较多,易于标本的长期保存。5.对有稀释的标本行直接涂片,离心重悬(centrifuge andresuspended)后涂片及利用离心沉淀物周围滤液涂片三种涂片方法比较,结果离心重悬后涂片效果较好。石蜡切片细胞过于密集,不适于细胞形态学观察。结论:在外伤患者中,玻璃体细胞学对外伤性脉络膜视网膜疾病的诊断及预后有辅助提示作用。虽然应用特殊染色未能直接检出病原体,但通过检验炎性细胞的种类也对外伤后脉络膜视网膜脱离及眼内炎的发生起到预示作用,为临床医师采取更好的治疗方法提供可能。此外其他相同类型疾病的细胞病理学表现出了一定的共性,这些共性可以帮助我们更好的了解疾病的发病机理,从而对临床的诊疗起到积极的指导作用。
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