本文对血管内皮细胞（ECs）的功能、损伤及损伤标志物、活性氧对生物机体的损伤等进行介绍,对电化学生物传感器及其研究前景做了叙述与简单总结。以ECs为研究对象,考察了高糖环境与光敏活性氧自由基对细胞活性的影响和还原性小分子小檗碱对细胞损伤的保护作用。利用纳米复合材料,基于芬顿型反应,建立了一种针对损伤标志物内皮素的电化学分析方法。研究工作主要内容如下:一、利用显微镜观察了人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）在含有四种浓度葡萄糖（11 m M、20 m M、50 m M、100 m M）的培养基中的细胞形貌,基于MTT比色分析和电化学测试考察了培养基中葡萄糖浓度对HUVECs活性的影响。研究发现,高糖环境可导致细胞形态的明显变化和细胞活性的下降,细胞损伤程度随培养基中葡萄糖浓度的升高而增大。0.01μM和0.1μM小檗碱对50 m M葡萄糖环境中损伤的细胞具有明显的保护作用,但1μM小檗碱由于自身的细胞毒性对HUVECs的保护作用不明显。细胞形貌和MTT测量结果均表明,氧化剂H2O2可引起细胞的氧化损伤,0.1μM小檗碱对细胞具有一定的修复功能;而H2O2和高糖环境的共同作用造成了细胞的严重损伤且小檗碱的保护作用不明显。二、利用吸收光谱研究了光照氨茶碱—核黄素（Am-Rf）体系的化学反应。细胞形貌观察和MTT比色分析结果表明光照Rf产生的~1O2和~3O2、光照Am-Rf体系产生的羟基自由基（?OH）均能导致HUVECs的损伤且后者的影响程度更大。小檗碱能使光照Rf和光照Am-Rf体系损伤细胞的活性上升约5%,说明其对光敏活性氧自由基导致的ECs损伤具有一定的修复作用。高糖环境下光照Rf和光照Am-Rf体系对HUVECs的损伤更加严重,表明高血糖条件下ECs更易受到氧化损伤。加入小檗碱细胞活性上升不到2%,说明此时HUVECs损伤机制较为复杂,还原性小分子的修复作用有限。三、采用循环伏安法（CV）制备了聚硫瑾（PTH）修饰的玻碳电极（GCE）并通过双功能试剂戊二醛将内皮素（ET,抗原Ag）固定于电极表面。制备了具有类酶功能的内皮素抗体-纳米金-Cu（II）复合物（Ab-GNPs-Cu（II））并使用透射电镜、紫外-可见光谱与红外光谱表征。由于Cu（II）与H2O2的芬顿型反应产生的?OH能够有效氧化PTH,修饰电极GCE/PTH/Ag/Ab-GNPs-Cu（II）在含有H2O2的0.1 M p H 6.5PBS中进行CV扫描时表现显著的还原峰。利用待测ET和复合物混合液制得上述修饰电极,但由于结合ET后电极表面较强的空间位阻效应导致固定的Ab-GNPs-Cu（II）减少和Cu（II）催化位点被掩盖,使得芬顿型反应受到抑制,从而造成CV曲线中还原峰峰高的降低,由此建立了一种灵敏的ET电化学测量方法。最优条件下,差分脉冲伏安法测量电流信号差值与ET浓度在0.5-500 ng m L-1的范围内呈良好的线性关系。对含有不同浓度葡萄糖的HUVECs生长培养基的分析表明,葡萄糖浓度越高,细胞损伤程度越大,细胞释放的ET的量越多。