固本抑瘤Ⅱ号对人A549肺癌细胞、小鼠Lewis肺癌作用的实验研究

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肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,在我国大城市中肺癌的发病率和死亡率居肿瘤之首,在农村居第4位,严重威胁着人类健康,肺癌的治疗研究成为肿瘤研究的焦点之一。由于西药放、化疗毒副作用大,作用范围局限,使得中医药在肺癌治疗中的优势表现得越来越明显。中医认为肺癌主要是由于脏腑虚损、血瘀痰凝毒结而成。癌症病人,尤其是中晚期癌症患者普遍存在血瘀证或气虚血瘀证,应对证采用益气活血法治疗。益气活血法属于“扶正祛邪”范畴,具有益气不留寇,驱邪不伤正的功效。固本抑瘤II号是北京市中医医院治疗气虚血瘀证肿瘤患者的有效方剂,常配合化疗应用。临床资料表明该方能够改善患者生活质量,减轻化疗的毒副作用。为探讨该方药抑瘤的有效成分及作用机制,本实验选用人肺腺癌细胞株A549,通过全方及拆方研究,观察该方及方中不同组分中药对A549细胞生长的影响,寻找固本抑瘤Ⅱ号方中抑瘤及化疗增效作用的主要成分。选用小鼠Lewis肺癌模型,观察该方及与化疗药物CTX合用对移植瘤、转移瘤的作用,以及固本抑瘤Ⅱ号方对小鼠免疫功能、荷瘤生存时间及细胞凋亡的影响,探讨该方的作用机制,指导临床合理用药。1.固本抑瘤II号及其拆方对A549抑瘤作用及与化疗联合用药的实验研究固本抑瘤II号全方和根据功效拆分的益气组、行气活血组、培补肝肾组、散结消癥组药物,分别制备水提物。采用MTT法检测各组药物对A549细胞生长的影响及与DDP联合作用的效果,FCM检测细胞周期和凋亡。结果显示:单独应用全方和行气活血组水提物对A549细胞生长表现为抑制作用,IC50分别为33.21mg生药/ml和9.55mg生药/ml;与DDP合用表现为增效作用,增效倍数分别为1.23和1.77,合并指数为1.05和0.83,表现出协同和相加作用;全方和行气活血组水提物能够使A549细胞生长阻滞在G0/G1期,百分比为84.16%和86.21%,减少进入S期的细胞数量。2.固本抑瘤II号方对Lewis肺癌抑制作用及与化疗药联合应用的实验研究60只体重19±1g雄性C57BL/6小鼠随机分对照组(Control)、CTX化疗组(CTX)(30mg/Kg CTX腹腔注射)、固本抑瘤II号小剂量组(M)(35g/Kg·d灌胃)、大剂量组(H)(70g/Kg·d灌胃)、小剂量加CTX组(M+CTX)、大剂量加CTX组(H+CTX),每组10只。观察固本抑瘤II号对Lewis肺癌移植瘤与转移瘤的作用,及与CTX合用的效果。结果显示:固本抑瘤II号M组、H组的抑瘤率(IR)分别为23.35%、36.82%,瘤重分别为2.82±1.56g、2.32±1.06g,与对照组3.68±1.10g相比明显缩小,分别p<0.05;M+CTX、H+CTX组抑瘤率分别为71.49%、67.13%,与CTX组的63.35%抑瘤率相比未表现出明显差异;但联合用药效应为0.85<q<1.15,表现为相加作用。M+CTX、H+CTX组肺转移阳性率分别为80%、
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