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中药化学成分十分复杂,且具有生物活性的部位含量较少,所以中药成分的分离纯化是中药研究的重要内容。而色谱法作为中药成分分离纯化的核心技术,仍解决不了中药化学成分的系统性分离,本论文以五味子为研究对象,并以自主研发的二维反相液相色谱仪-制备色谱工厂结合色谱专家系统软件,建立了一种系统性、高通量的分离制备方法,也为其他中药成分的分离制备提供参考。本文以五味子木脂素粗提物为研究对象,以TLC、HPLC为检测手段,并对萃取溶剂及洗脱比例进行研究,对五味子活性成分-木脂素类化合物,进行初步分离。结果表明,萃取是简单有效的色谱前处理技术,萃取剂选择乙酸乙酯和石油醚,体积比为1:1,可以将五味子木脂素初步分离富集。以五味子萃取样品为研究对象,以HPLC为检测手段,色谱柱选择C18柱(250×4.6mm;5μm),水和甲醇作为流动相,选定30个色谱峰,采集4个不同洗脱梯度下的保留时间,峰高等色谱信息,通过Xtool色谱分离专家系统,进行第一维、第二维色谱分离方法开发的模拟与优化,结果发现,五味子样品色谱峰的保留时间与XTool软件模拟的梯度洗脱条件下的色谱峰的一致,证明色谱分离专家系统预测二维色谱分离的方法具有可行性。制备分离采用线性放大方法,结果得到进样浓度为80mg/mL,进样量为2mL,流速为21ml/min,此时色谱峰具有明显分离。第一维分离柱选择C18(250×30mm;10μm),水和甲醇作为流动相,富集柱选择C18(80×30mm;10μm),辅助泵以水为富集稀释液,以色谱保留时间为考查指标,对五味子木脂素进行重现性验证,3次一维分离后的色谱保留时间的相对标准偏差均小于3%,说明二维反相液相色谱分离具有良好的重现性。最后,五味子木脂素进行第一维色谱分离制备,得到了9个可重复获得的组分。将PCP切换至二维分离模式,分离柱选择C18(250×30mm;10μm),进样量和流速与一维分离相同,水和甲醇作为二维分离的流动相,最后,第二维分离得到20个可重复获得的组分。在PCP一维分离模式下,将10个纯度达90%的二维分离样品利用制备色谱工厂进一步分离纯化,采用HPLC、核磁氢谱、碳谱等波谱学测试手段,鉴定得到了5个木脂素类单体化合物五味子醇甲、戈米辛A、五味子甲素、戈米辛N、五味子丙素。实验结果表明,以自主研发的制备色谱工厂系统为核心,结合色谱分离专家系统软件优化五味子木脂素分离制备条件,建立的分离制备五味子木脂素有效部位及单体化合物的方法,具有良好的重现性,能够实现五味子木脂素类活性成分的系统性、可重复的分离制备。对五味子木脂素的分离纯化及其它中药成分的分离制备具有重要的意义。