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1研究背景和目的日本学者发现定位在乙醛脱氢酶2(acetaldehyde dehydrogenase2, ALDH2)基因上的rs671位点变异与食管癌高风险密切相关,ALDH2基因变异导致乙醇正常代谢过程中乙醛降解受阻,并在血液中蓄积,造成饮酒后脸红。这一发现使近年对脸红、ALDH2基因变异和肿瘤发病风险的研究受到关注,但研究结果不尽一致,这可能与不同肿瘤、不同人群有关。而中国人ALDH2基因rs671位点变异和脸红及饮酒与食管癌的发病风险和预后关系尚不清楚。本课题通过病例对照研究,探讨脸红及脸红家族史、饮酒与rs671位点变异的关系及其对食管癌发病风险和预后的影响,以期提供食管癌高危人群预警、筛查和预后的有效指标和方法。2材料与方法2.1研究对象研究对象均来自于河南省食管癌重点开放实验室信息资料库,病例组来自1975至2012年的食管癌住院患者,均经病理诊断为食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC),对照组来自于同一时期和地区的正常人群。所有对照组人群均经食管内镜检查,排除上消化道肿瘤。病例组共3759例,其中,男性3030例,平均年龄59.1±8.7岁；女性729例,平均年龄60.6±9.4岁。对照组共5196例,其中,男性3447例,平均年龄47.5±12.4岁；女性1749例,平均年龄49.1±11.8岁。2.2脸红、饮酒和吸烟的判断标准脸红指少量饮酒(50m1)后,短时间出现面部潮红。不饮酒指从不饮酒或偶尔饮酒(1年内不超过3次,每次不超过50ml),不吸烟指从不吸烟或偶尔吸烟(1年内不超过3支),否则记录为饮酒和吸烟。2.3问卷调查在村庄或医院对患者/家属/村医进行问卷调查,调查内容包括一般情况、脸红、脸红家族史、吸烟、饮酒、肿瘤家族史、治疗情况等；病例组完成脸红、饮酒和吸烟调查记录的患者例数分别为3759(100%),3651(97%)和3653例(97%)；对照组分别为5040(97%),5196(100%)和5146例(99%)。2.4临床病理资料的收集根据流调信息到患者所治疗的医院回顾性调查住院病历,进行临床病理信息核查及补充。2.5生存随访随访时间从调查当日起,至患者死亡,末次随访时间为2013年11月。3759例患者中家庭住址准确、联系电话清楚2921例,成功随访2645例,随访率为90.6%。2.6血样采集、DNA提取和Taqman基因分型对每位患者和正常对照进行详细问卷调查后,签署知情同意书,抽取3～5m1的空腹外周静脉血置于EDTA抗凝管中,-20℃冰冻保存。采用德国Qiagen Flexi Gene DNA提取试剂盒提取外周血白细胞全基因组DNA。采用Taqman(?)基因分型技术,检测ALDH2基因rs671位点基因型。2.7统计分析所有数据采用SPSS19.0进行统计学分析。采用χ2检验、Logistic回归、寿命表法、Kaplan-Meier法、Cox回归模型等方法进行统计。检验水准：α<0.05。3结果3.1脸红及脸红家族史、饮酒和吸烟与食管癌发病风险分析脸红、脸红家族史阳性、饮酒和吸烟者食管癌的发病风险都增加(OR值分别为1.26,1.23,2.11,1.47；95%CI分别为1.14-1.38,0.79-1.90,1.93-2.30,1.35-1.60；P值分别为1.33E-6,0.36,4.56E-65,7.87E-19)。脸红和饮酒因素叠加后,脸红不饮酒者ESCC发病风险最高(OR=2.33,95%CI:2.01-2.71; P=4.01E-28)。脸红、饮酒和吸烟因素叠加后,不脸红但吸烟饮酒者ESCC发病风险最高：(OR=3.17,95%CI：2.61-3.86；P=2.89E-31)。3.2脸红和rs671位点变异的关系rs671位点突变频率脸红的比不脸红的高19.4%(χ2=47.25,P=-6.24E-12)。病例组脸红和脸不红者的rs671位点突变频率分别为85(33.6%)和76(19.9%)(χ2=15.10,P==1.00E-4)；对照组脸红和脸不红者的rs671位点突变频率分别为133(32.3%)和71(15.5%)(χ2=34.07,P=5.23E-9)。病例组脸红和不红者,rs671位点野生型和突变型,按照各病理信息进行分层分析,其分布均无差异。3.3脸红和rs671位点变异与食管癌患者生存分析食管癌患者脸红组生存期优于不脸红的患者(χ2=5.10,P=0.02),与脸不红组相比,脸红组患者在高发区、男性、BMI正常者、不饮酒者、食管下段、原位癌、无淋巴结转移、低分化和未分化、肿瘤长径<4cm、髓质型、早期和中期食管癌等因素进行分层相关分析时,脸红组患者均优于脸不红组的患者。rs671位点野生型和突变型的生存期无差别(χ2=0.18,P=0.68),按照各临床病理信息进行分层分析,每层中rs671位点野生型和突变型的生存期均无差异。3.4Cox回归模型发病年龄、高低发区、BMI和淋巴结转移是影响ESCC患者预后的独立危险因素(P值分别为0.001,1.85E-5,0.04,8.78E-6)。4结论4.1饮酒、脸红者食管癌发病风险明显升高；4.2脸红与rs671位点变异相关；4.3食管癌患者脸红组生存期优于不脸红的患者,但是,ALDH2基因野生型和突变型与患者生存期无关；4.4食管癌预后的独立危险因素是发病年龄、高低发区、BMI和淋巴结转移。