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随着近年来研究的不断深入,越来越多的证据表明雌激素受体(estrogenreceptor,ER)在乳腺癌细胞的增殖以及乳腺癌的发生与发展中发挥了重要的作用。ER是甾体类激素依赖式的乳腺癌预后的重要标志物,是类固醇受体超家族中的成员,介导雌激素引起的下游基因转录。ER一般定位于核内,分为ERα和ERβ两种亚型。雌激素受体最重要的作用是调节与细胞生长、凋亡相关基因的表达。如:PR、pS2、c-fos、c-Myc、cathepsin D、EGFR、cyclin D1和bcl-2等,从而调控细胞的增殖、发育和分化。CUEDC2是一个包含CUE结构域的功能未知蛋白质。CUE结构域是一个很小的,中度保守的,约含40个氨基酸残基的泛素结合结构域,它广泛存在于真核细胞表达的蛋白质中。我们前期的研究发现,CUEDC2能够介导GADD34/PP1(蛋白磷酸酶1和其调节亚基)与IKK复合物的结合,通过招募PP1抑制IKK磷酸化,进而抑制NF-κB的激活。我们还发现,CUEDC2通过促进PR的泛素化降解进而下调PR的转录激活活性,抑制孕激素介导的MAPK通路激活,废除孕激素对于乳腺癌细胞生长的影响,从而抑制乳腺癌细胞的增殖能力。ER作为PR的上游分子,也是乳腺癌预防及治疗当中重要的生物学指标,CUEDC2是否也能影响ER的功能是本文探索的重点。通过GST pulldown和免疫共沉淀实验,我们发现CUEDC2能够与ERα和ERβ发生体内外相互作用。而且,在共转染ERα和CUEDC2的细胞中,我们发现两者共定位于细胞质,并且ERα在细胞质内定位增加,提示CUEDC2可能抑制ERα的入核。通过双荧光报告系统测定CUEDC2对ERα和ERβ的转录活性影响,我们发现CUEDC2能够显著抑制ERα和ERβ的转录激活活性。进一步我们发现CUEDC2能够以雌激素非依赖的方式下调ERα的蛋白质水平,干涉内源CUEDC2后,ERα的蛋白质水平明显上调,并且有效废除了雌激素对ERα的降解,Rescue实验证明了CUEDC2对ERα蛋白质水平的负向调控具有特异性。但CUEDC2并不能影响ERβ的蛋白质表达水平。综上,我们发现了一个ER的负性调节分子CUEDC2,能够与ERα发生相互作用,下调ERα的蛋白质表达水平,并且抑制ERα的转录激活活性,同时发现CUEDC2也能够与ERβ相互作用并抑制其转录激活活性。研究结果为研究CUEDC2在雌激素受体信号通路中的作用提供了线索。