山药片脱硫方法及二氧化硫限量标准研究

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qipini
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  目的:探讨硫熏山药饮片中的二氧化硫的脱除方法;深入研究脱硫后对山药饮片内在质量的影响,对山药饮片中腺苷、-谷甾醇两个有效化学成分进行含量测定,并比较脱硫前后两种有效化学成分的差异性;对脱硫山药饮片和无硫山药饮片进行 HPLC 指纹图谱研究,建立不同加工方法下山药饮片的 HPLC 指纹图谱,从整体上评价脱硫对山药饮片质量产生的影响;同时通过脱除硫熏山药饮片中二氧化硫,控制二氧化硫残留量,为制定山药饮片二氧化硫限量标准提供可靠依据。   方法:通过查阅文献,没有关于中药饮片脱除二氧化硫的方法,参考食品中脱除二氧化硫的方法,通过蒸、微波处理、水浸以及叶绿体处理等方法脱除硫熏山药饮片中的二氧化硫残留量;采用 HPLC 法测定腺苷、-谷甾醇的含量,对比脱硫前后两种化学成分的差异性;建立脱硫山药饮片和无硫山药饮片十批药材的 HPLC 指纹图谱,并通过中药色谱指纹图谱评价系统进行相似度分析,从整体上评价脱除硫熏山药饮片中二氧化硫后对山药质量的影响。   结果:通过研究,使用蒸、微波处理、水浸以及叶绿体处理等方法脱除硫熏山药饮片中的二氧化硫均有效果,其中叶绿体脱除效果最好。通过对叶绿体脱除二氧化硫方法的研究,综合评价分析 pH 值、温度、叶绿体量等对脱硫率的影响。采用单因素考察法分别对不同 pH 值、温度、叶绿体用量、时间、缓冲溶液等工艺条件的筛选,最佳条件是 pH8、温度20℃、叶绿体 1g、反应时间 3h、缓冲溶液为柠檬酸-Na2HPO4 缓冲液;采用 HPLC 法对脱硫前后山药饮片中腺苷和 -谷甾醇进行含量测定,腺苷的 HPLC 色谱条件为:色谱柱为 SunFire C18 (4.6×250mm, 5μm) ;流动相为磷酸盐缓冲液( pH=6.5)-甲醇( 85:15); 检测波长为 260nm;流速为 1mL·min-1;柱温为 25℃;进样量 3μL;腺苷的含量在 0.01510-0.7550μg范围内线性关系良好, R2=0.9997;其加样回收率为 98.51%, RSD 值为2.13% 。 - 谷 甾 醇 的 HPLC 色 谱 条 件 为 : 色 谱 柱 为 SunFire C18 (4.6×250mm,5μm);流动相为甲醇-水( 99:1);检测波长为 204nm;流速为 0.8mL·min-1; 柱 温 为 25℃ ; 进 样 量 10μL; -谷 甾 醇 的 含 量 在0.3500-1.7500 μg 范 围 内 线 性 关 系 良 好 。 R2=0.9995,其 加 样 回 收 率 为99.12%, RSD 值为 2.26%。对脱硫山药饮片和无硫山药饮片总十批饮片建立 HPLC 指纹图谱,并进行方法学考察,对其特征峰进行分析,确认有8 个共有峰初步建立山药饮片 HPLC 指纹图谱及其质量评价方法。   结论:本课题对脱除硫熏山药饮片中二氧化硫的方法进行了研究,初步确立了脱除硫熏山药饮片中二氧化硫的方法;并考察了脱硫对山药饮片内在质量的影响;建立了山药饮片 HPLC 指纹图谱及质量评价方法;综合评价了脱硫前后山药饮片内在质量的变化,更全面的控制山药饮片的内在质量。
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