[目的]1、建立一个在病理生理机制上接近我国常见急性肝衰竭发病特点的大动物模型,从而应用于生物人工肝治疗的临床前研究;2、通过对急性肝衰竭猪模型的序贯监测,找到生物人工肝治疗干预的适宜时间窗;3、检测伴刀豆球蛋白A（Concanavalin A,ConA）诱导的急性肝衰竭猪模型肝组织中的自噬表达情况,分析自噬在免疫性肝损伤中的作用机制,从而利用此动物模型寻找治疗急性肝衰竭的新手段。[方法]1、以高原滇南小耳猪为实验研究对象,经耳缘静脉注射ConA建立急性肝衰竭的大动物模型。实验动物随机分为2组,分别是ConA药物造模组（3只,静脉注射ConA）和正常对照组（3只,静脉注射等量5%GS）,于给药前（0h）及给药后2、4、6、8、10、12、24h留取血液标本送检肝功、血糖、凝血及血氨。观察记录两组猪的一般情况,待猪死亡后,取肝组织行苏木素-伊红（HE）染色观察病理学改变。2、实时荧光定量PCR检测两组猪肝组织中自噬相关基因Atg5、Atg7、Beclin-1、Lamp-1 和 LC3a 的 mRNA 表达。3、Western blot检测两组猪肝组织中上述自噬相关基因的蛋白表达水平。[结果]1.成功建立了与人在临床表现、生化指标、组织病理学改变相似的急性肝衰竭滇南小耳猪模型:1.1 一般情况:造模组猪静脉注射ConA后表现出明显的食欲下降,大小便次数减少,尿色加深,呼吸频率增快,部分动物出现呕吐,呕吐物为白色分泌物;1.2神经系统变化:与对照组相比,造模组猪精神萎靡、目光呆滞,对疼痛刺激反应低下,步态不稳,时有烦躁不安,并随着时间的推移出现嗜睡、昏迷等表现;1.3生存时间:ConA诱导的造模组猪在无任何干预条件下,均于给药24h后死亡,平均存活时间28.5±1.8h;1.4有关肝功能的生化指标:造模组猪的血清总胆红素、总胆汁酸、丙氨酸氨基转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、血氨、国际标准化比值在给药后均有不同程度的升高,6h及8h时较对照组有显著差异（P＜0.05）。造模组猪的血糖值较对照组降低,但差异无统计学意义。血清白蛋白在两组猪之间的比较亦无显著差异。总胆汁酸、天门冬氨酸氨基转移酶在给药后2h即出现升高,24h达高峰;总胆红素、丙氨酸氨基转氨酶、血氨及INR在给药后4～6小时升高,至24h时达峰值。与丙氨酸氨基转氨酶相比,天门冬氨酸氨基转移酶升高更显著,二者相差约3～5倍。1.5肝组织病理学表现:造模组猪肝细胞呈点片状及桥接坏死,坏死区域伴炎细胞浸润,肝小叶结构不清,部分区域可见界面炎,甚至伴有出血及急性胆管炎。对照组猪肝组织病理学检查未见异常。2.通过 Realtime PCR 及 western blot 检测自噬相关基因 Atg5、Atg7、Beclin-1、Lamp-1和LC3a在两组猪肝组织中mRNA和蛋白质的表达情况,发现造模组猪的自噬表达明显增强。[结论]1.以ConA诱导的滇南小耳猪急性肝衰竭模型很好的模拟了临床急性肝衰竭常见病因的发病特点;2.该模型的制作方法简单、重复性好,采用前腔静脉置管建立的循环通路可以满足序贯采血及生物人工肝体外循环的需要;3.造模组与对照组猪肝功能衰竭相关的各项指标在ConA给药后6-8h具有显著差异,此时若不进行干预,实验动物在给药24h后相继出现死亡,故给药后24h内为人工肝治疗的最佳时间窗;4.ConA诱导的急性肝衰竭滇南小耳猪模型肝组织中自噬相关基因表达增强,这与病毒性肝炎及自身免疫性肝病的自噬表达水平一致,故该模型还可用于免疫性肝损伤有关自噬方面的进一步研究。