壳聚糖修饰矿化煅烧骨的成骨能力研究

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牙周病是一种口腔感染性疾病,可导致牙龈红肿和牙周组织破坏,最后使牙齿缺失。其治疗的最终目标是消除牙周炎症,阻止牙周疾病的发生发展,促进组织再生,修复牙周组织的生理结构与功能。口腔生物材料学研究和各种骨组织再生技术的发展,不断提高了牙周病治疗效果,推动了口腔种植技术和临床种植修复效果的提升。目前,人工合成的各种种植材料,特别是各种促进骨组织再生材料的开发研究依然是基础研究的热点。目的:初步探究煅烧牛松质骨表面经羟基磷灰石(HA)和壳聚糖(CS)修饰后的力学性能和成骨能力,为牙周支持组织缺失修复的植骨材料研究提供一种新的思路。方法:通过高温煅烧的方法,将牛松质骨材料经二次不同温度煅烧,经模拟体液(SBF)浸泡,煅烧骨材料表面沉积大量的矿化物质,再经CS溶液浸泡致使煅烧骨材料表面负载大量的CS,从而极大改变了煅烧骨表面的生物学性质。煅烧骨材料经HA和CS修饰后分别获得β-磷酸三钙材料(β-TCP)、β-TCP/HA材料和β-TCP/HA/CS复合材料;采用EDX能谱分析仪、万能材料测试机和Micro-CT揭示复合材料的理化性能;通过Live-Dead荧光试剂盒和MTT试剂盒检测β-TCP材料表面经HA和CS修饰后对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与分化的影响;通过细胞粘附率实验研究β-TCP材料表面经HA和CS修饰后的细胞相容性;通过碱性磷酸酶试剂盒和QRT-PCR法检测成骨细胞早期成骨标志性蛋白碱性磷酸酶(ALP)表达和成骨细胞后期成骨标志性成骨基因mRNA的表达,从而探究该复合支架材料的促成骨性能。结果:煅烧牛骨的成分为β-TCP,矿化煅烧骨表面的成分为HA;β-TCP/HA/CS复合材料的孔径为130~446μm,β-TCP材料的孔隙率为(71.52±0.18)%,β-TCP/HA材料的孔隙率为(70.86±0.22)%,β-TCP/HA/CS材料的孔隙率为(70.25±0.22)%,材料间的孔隙率无明显变化(P>0.05);β-TCP/HA/CS材料的力学性能显著高于β-TCP/HA材料和β-TCP材料(P<0.01),而β-TCP/HA材料高于β-TCP材料(P<0.05);材料均具有无毒性,与BMSCs具有较好的相容性;β-TCP/HA/CS材料和β-TCP/HA材料与β-TCP材料相比,BMSCs中的ALP表达活性显著性增加(P<0.01),β-TCP/HA/CS材料高于β-TCP/HA材料(P<0.01);β-TCP/HA/CS材料与β-TCP/HA材料和β-TCP材料相比成骨基因骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原纤维(COLⅠ)显著性增加(P<0.01),β-TCP/HA材料与β-TCP材料相比,成骨基因COLⅠ显著性升高(P<0.01),但OPN和OCN无显著性变化。结论:β-TCP/HA/CS是一种具有良好的力学性、细胞相容性和成骨诱导性复合支架材料,为牙周组织缺损的口腔种植修复治疗、开发使用良好的骨组织再生材料提供了新思路。
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