海洋是人类生存和发展的重要物质基础,而海上溢油污染是影响海洋环境安全的主要问题,溢油污染对海洋生态系统具有极为严重的影响。海洋微藻是海洋生态系统中的低级生产者,为海洋供应主要初级生产力,同时对生态系统的物质循环与能量流动起着关键性作用。海洋微藻作为海洋环境中的主要浮游生物,其健康状态和海洋生态环境息息相关。目前关于石油类对海洋微藻生长影响的研究已较为广泛,其基本上围绕着石油水溶解组分(WAF)的浓度变化展开研究,得出石油烃对浮游微藻生长“低促高抑”的现象[1],即低浓度促进生长,高浓度抑制生长。在东海海域,各大油田开采均为轻质原油,鉴于其极易挥发的特性,与之前的研究结果可能存在较大差异。所以,本文采用轻质原油水溶解组分及轻质原油进行实验,对东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)、赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)和中肋骨条藻(Skeletonema costatum)在不同温度和光照下的生长速率及叶绿素a含量进行实验研究,初步认识轻质原油胁迫对微藻的毒性机制,这将在石油污染对海洋微藻生长影响方面,填补轻质原油领域的空白,为海洋石油污染的应急处置、损害赔偿和综合管理提供重要的基础数据和技术支撑。1轻质原油WAF对三种海洋微藻生长及叶绿素的影响(1)轻质原油WAF对微藻的生长具有显著的抑制作用,低浓度(0.73 mg·dm-3)时轻质原油WAF对微藻生长的影响相对较小,与对照组相比作用不明显,而轻质原油WAF浓度较高时对三种微藻的生长具有显著的抑制作用,相同时间内轻质原油WAF浓度越高抑制作用越强。(2)依据三种微藻的轻质原油胁迫96-h EC50可知,三种海洋微藻对轻质原油WAF的毒性敏感性大小顺序为:东海原甲藻>中肋骨条藻>赤潮异弯藻。(3)轻质原油WAF对三种微藻的叶绿素a含量均有不同程度抑制作用。赤潮异弯藻敏感性略高于东海原甲藻和中肋骨条藻。(4)温度是影响微藻生长和轻质原油WAF毒性效应的关键性因素。温度升高,三种微藻的细胞密度和叶绿素含量同步上升,但不同轻质原油WAF浓度间的差异性也越加明显。(5)光照强度对微藻生长和叶绿素含量也有显著影响。在实验范围内,光照越强微藻生长越快,叶绿素a含量越高,但相应的石油烃毒性胁迫越明显。2轻质原油对三种海洋微藻生长及叶绿素的影响(1)轻质原油具有高挥发性特征。本实验相比轻质原油WAF实验,微藻对轻质原油初始浓度耐受性提高了10倍之多。(2)轻质原油对微藻生长有一定抑制作用。因轻质原油的高挥发性,轻质原油胁迫下对微藻生长的抑制作用并不明显,各组基本能恢复正常生长。(3)依据三种微藻的轻质原油胁迫96-h EC50可知,三种海洋微藻对轻质原油的毒性敏感性大小顺序为:东海原甲藻>中肋骨条藻>赤潮异弯藻。(4)通过对照不同轻质原油浓度下三种微藻的叶绿素a含量变化得出,赤潮异弯藻较为敏感,。随着轻质原油浓度提高,三种海洋微藻叶绿素a含量均明显减少,处理组和对照组之间的差异性显著增强。(5)温度是影响本实验的关键性因素,随着温度升高,三种微藻的细胞密度和叶绿素含量同步上升,轻质原油不同浓度对微藻的影响作用越显著。(6)光照强度也是影响实验中微藻生长和叶绿素含量的重要因素,在实验范围内,光照越强微藻生长越快,叶绿素a含量越高,但相应的石油烃毒性胁迫越明显。3动态加油对三种海洋微藻生长及叶绿素的影响(1)本实验为持续加油实验(分别间隔6 h、12 h和24 h),轻质原油挥发后,间断加油的操作直接导致轻质原油胁迫效应的持续和增大,有一定模拟持续溢油的效果。(2)实验结果显示,低浓度(10 mg·dm-3)时轻质原油对微藻生长的抑制作用相对较小,与对照组相比作用不显著,而轻质原油浓度较高时对三种微藻的生长均表现出显著的抑制作用,相同时间内轻质原油浓度越高抑制作用越显著。加油频率也是影响轻质原油抑制作用的重要因素,频率越高抑制作用越明显。(3)依据三种微藻的轻质原油胁迫96-h EC50可知,三种海洋微藻对轻质原油的毒性敏感性大小顺序为:东海原甲藻>中肋骨条藻>赤潮异弯藻,加油频率对微藻抑制作用大小顺序为:6 h>12 h>24 h。(4)轻质原油胁迫降低微藻叶绿素含量,加油频率越高影响越大。随着轻质原油浓度提高,三种海洋微藻叶绿素a含量均明显减少,处理组和对照组之间的差异性显著增强。(5)温度是影响本实验的关键性因素,随着温度升高,三种微藻的细胞密度和叶绿素含量同步上升,不同轻质原油浓度间的差异性显著增强。(6)光照强度也是影响实验中微藻生长和叶绿素含量的重要因素,在实验范围内,光照越强微藻生长越快,叶绿素a含量越高,但相应的石油烃毒性胁迫越明显。