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皮肤鳞状细胞癌(squamouscellcarcinoma，SCC)，是起源于表皮附属器角质形成细胞的一种恶性肿瘤，具有病因复杂、临床误诊率高、恶性度大及侵袭性和破坏性强等特点。目前皮肤鳞癌的治疗方法有手术切除、放射治疗、外用药物治疗及光动力治疗等。光动力疗法(Photodynamictherapy，PDT)又被称为光辐射疗法(PhotoratiationTherapy，PRT)或光化学疗法(Photochemotherapy)，是一种正在研究发展中的，治疗某些体表良、恶性病变的有效方法，部分成果已经应用于临床。近年来，5-ALA（5-aminolevulinicacid，5-氨基酮戊酸）介导的光动力疗法(5-ALA-PDT)成功应用于非黑素性皮肤癌的治疗，但其作用机制还有待于研究阐明。
目的:
1.检测ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白和mRNA在人皮肤鳞状细胞癌A431细胞中的表达，探讨其临床意义;
2.观察5-ALA-PDT对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的杀伤灭活作用;
3.观察5-ALA-PDT后人皮肤鳞状细胞癌A431细胞中ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白表达水平的变化，探讨5-ALA-PDT诱导人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡的可能机制，为光动力治疗皮肤鳞状细胞癌提供理论依据。
方法:
1、采用WesternBlot法和RT-PCR法检测ID-1、Survivin和Caspase-3在人皮肤鳞状细胞癌A431细胞和角质形成细胞（Hacat细胞）中的表达水平;
2、A431细胞与5-ALA共同培育，经630nm激光照射后，采用MTT法测其细胞抑制率，探讨培育时间、5-ALA浓度及光照剂量对其介导的光动力效应的影响;
3、A431细胞经5-ALA-PDT处理后，分别于0h、2h、6h、12h、24h、48h后提取蛋白，采用WesternBlot法检测ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白的变化。
结果:
1、ID-1和Survivin蛋白和mRNA在人皮肤鳞状细胞癌A431细胞中高表达，而在Hacat细胞中低表达或不表达，其表达强弱差异有统计学意义(P＜0.05);而Caspase-3蛋白和mRNA的表达与之相反，其表达差异也有统计学意义(P＜0.05);
2、光照剂量和5-ALA浓度相同时，5-ALA与A431细胞共同培养120min时，其介导PDT的杀伤作用最强;
3、光煎剂量和培养时间相同时，5-ALA浓度为3.2mmol/L时，其介导PDT的杀伤作用达到了饱和;
4、培养时间和5-ALA浓度相同时，光照剂量为80J/cm2时，其对A431细胞的抑制率达到最大;
5、单独照光及单独加药对A431细胞并无杀伤或促进其生长的作用;
6、ID-1和Survivin在5-ALA-PDT处理后的A431细胞中蛋白表达水平随时间延长呈下降趋势，其差异具有统计学意义(P＜0.05);
7、Caspase-3在5-ALA-PDT处理后的A431细胞中蛋白表达水平随时间延长呈上升趋势，其差异具有统计学意义(P＜0.05)。
结论:
1、高表达的ID-1和Survivin，低表达的Caspase-3可能参与皮肤鳞癌的形成;
2、5-ALA-PDT对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞有明显的杀伤效应;
3、5-ALA-PDT诱导人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖或凋亡的机制，可能与5-ALA-PDT直接或间接抑制ID-1和Survivin的表达、促进Caspase-3的表达有关。