锌抑制降钙素基因相关肽表达影响神经病理性疼痛的实验研究

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目的探讨锌对辣椒素致痛模型脊髓及培养神经元中降钙素基因相关肽(calcitoningene related protein,CGRP)表达以及动物行为学的影响。方法48只C57/BL6小鼠随机分为4组,以足底注射辣椒素(0.5%,5μl)制备神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)动物模型。对照组喂锌饲料(锌30mg/kg/d)2周后足底注射溶剂(吐温80、酒精和生理盐水混合液);正常喂养组喂锌饲料(锌30mg/kg/d)2周后足底注射辣椒素;低锌喂养组喂锌饲料(锌0.85mg/kg/d)2周后足底注射辣椒素;高锌喂养组喂氯化锌水溶液(227mg/L/d)2周后足底注射辣椒素。应用动物行为学检测、免疫组织化学、免疫印迹和图像分析技术检测锌对动物行为学及脊髓CGRP表达的影响。体外实验部分采用原代培养小鼠皮质神经元,随机分成4组。对照组(Con):培养基培养24h后加入溶剂;正常培养组(N-NPP):培养基培养24h后加入辣椒素(200μmol.L-1);低锌培养组(L-NPP):氯碘羟喹(5μmol.L-1)培养24h后加入辣椒素(200μmol.L-1);高锌培养组(H-NPP):氯化锌水溶液(30μmol.L-1)培养24h后加入辣椒素(200μmol.L-1),各组分别于1min、5min、7min和10min后取材。应用免疫细胞化学、免疫印迹和图像分析技术检测锌对培养神经元CGRP表达的影响。结果注射辣椒素后,动物出现甩足和跛行等自主行为学变化,机械痛阈和热痛阈降低。高锌喂养能显著减轻动物自主行为学改变,使机械痛阈和热痛阈增高;低锌喂养则加重动物自主行为学改变,使机械痛阈和热痛阈更低(P<0.01)。此外,高锌喂养能显著降低脊髓和培养神经元中CGRP的表达(P<0.01);而低锌喂养能增加脊髓和培养神经元中CGRP的表达(P<0.01)。结论锌能抑制NPP模型小鼠脊髓和培养神经元中CGRP的表达,锌能抑制NPP。
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