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目的 宣肺定喘汤是导师在多年临床实践基础上,总结治疗哮喘经验而成的效方。本方为小青龙汤的加减方,其在《伤寒论》及《金匮要略》均有论述。小青龙汤适用用于外寒内饮的哮喘病证,其组方遵循了宣肺化饮、止咳平喘的治疗原则,为治疗哮喘之良方。本实验旨在探讨宣肺定喘汤对哮喘大鼠气道重构和炎症介质的抑制作用,为经方防治哮喘的研究开辟一条新途径,并为开发宣肺定喘汤作为平喘药物提供客观依据。同时在哮喘的中医药治则理论、复方哮喘药理的现代研究方面均具有一定的实践意义。 方法 通过文献研究考察小青龙汤治疗哮喘的现状,并以此为基础,通过实验初步揭示宣肺定喘汤对气道重构和炎症介质的抑制作用,具体方法如下: 1、宣肺定喘汤对哮喘大鼠支气管和肺组织形态学的影响的研究,采用光学显微镜观察哮喘大鼠肺组织形态学的改变;运用医学图文分析系统分析,测量支气管基底周径(Pbm)、总管壁面积(WAt)、内壁面积(WAi)及平滑肌面积(WAm),并用Pbm将测量值标准化,分别用WAt/Pbm、WAi/Pbm、WAm/Pbm表示相应管壁各层底厚度,观察哮喘大鼠肺组织气道重构的情况。 2、运用细胞记数法观察宣肺定喘汤对哮喘大鼠肺泡灌洗液(BALF)、外周血炎性细胞水平的影响。 3、运用放射免疫法观察宣肺定喘汤对哮喘大鼠外周血中IgE表达水平的影响。 4、运用ELIsA法和免疫组化法观察宣肺定喘汤对哮喘大鼠肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中Eotaxin表达水平的影响。 5、运用ELISA法和免疫组化法观察宣肺定喘汤对哮喘大鼠肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中ICAM-1表达水平的影响。 结果 1、通过光镜对宣肺定喘汤大、中、小剂量组大鼠肺组织切片的观察,发现宣肺定喘汤能明显缓解哮喘时肺组织内以嗜酸粒细胞为主的炎性细胞的浸润,且支气管壁的平滑肌增厚和炎性渗出物的增多都明显轻于病理模型组。宣肺定喘汤大、中、小剂量组肺组织切片WAt/Pbm、WAi/Pbm、WAm/Pbm各项数值与病理模型组相比有显著的差异(P<0.05),宣肺定喘汤大剂量组WAt/Pbm、WAi/Pbm、WAm/Pbm各项数值接近空白对照组。 2、宣肺定喘汤大、中、小剂量组大鼠肺泡灌洗液(BALF)及血中白细胞总数和嗜酸粒细胞数目与病理模型组相比有显著的差异(P<0.05)。 3、宣肺定喘汤大、中、小剂量组能显著降低哮喘大鼠血中IgE水平,与病理模型组相比,有显著差异性(P<0.05)。 4、宣肺定喘汤大、中、小剂量组大鼠肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中Eotaxin表达水平明显下降,与病理模型组相比,有显著性差异(P<0.05)。 5、宣肺定喘汤大、中、小剂量组大鼠肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中ICAM-1表达水平与病理模型组相比有显著性差异(P<0.05)。 结论 1、通过光镜下观察宣肺定喘汤能明显缓解肺组织内炎性细胞的浸润;通过医学图文分析系统分析,宣肺定喘汤能有效抑制哮喘大鼠肺组织平滑肌增厚及气