猪囊尾蚴cDNA表达文库的构建、筛选及目的基因的克隆和鉴定

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rilinx_2009
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本研究从猪囊尾蚴(Cysticercus cellulosae)中提取总RNA,并分离mRNA,进而构建了cDNA表达文库。鉴定结果表明:库容量为2×10~6,重组率为100%。利用抗血清作探针,对cDNA表达文库进行筛选,经初筛、复筛,最后确定了12个阳性克隆。对其中一个阳性克隆进行重组质粒、双酶切及PCR鉴定后,将双酶切产物与克隆载体连接并转化、测序,获得一含有1044bp的开放阅读框的完整基因。登录Genebank比较,此基因与已发表的cC1基因具有高度同源性,其核苷酸同源性为99.9%,氨基酸同源性为99.4%。
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