间断压力对体外培养成人骨髓基质细胞的作用研究

被引量 : 0次 | 上传用户:wisled
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:骨组织工程目前尚未能广泛地应用于临床,主要原因是各项研究内容实验依据尚不充分,大多停留在动物实验阶段。本实验借鉴前人的研究成果,取成人的骨髓液分离纯化得骨髓基质细胞进行体外培养,并对细胞施加间断气体压力,观察细胞在加压后的增殖及分化情况,以获得更多种子细胞,为骨组织工程学研究内容提供更多实验室依据,从而促进骨组织工程应用于临床。 材料与方法:取无骨髓疾病患者骨髓经分离纯化后得骨髓基质细胞,将细胞分为细胞检测组和原代压力实验和传代压力实验组。(1)细胞检测组:细胞接种于6孔板,用含有诱导因子的培养液培养。通过倒置显微镜和HE染色观察细胞大体形态;通过扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构;通过碱性磷酸酶染色、钙结节染色对细胞定性。另设对照组不加诱导因子,其余条件与实验组相同。(2)原代压力实验组:将细胞接种于96孔板内,在原代培养72Hour时将培养板以封口膜封闭后置于压力装置内,每天施加压力8小时,压力大小为0.098Mpa,按照加压15分钟→放压15分钟→加压15分钟的顺序,连续9天。另设对照组不加压力,其余培养条件与实验组相同。分别在加压的第3、6、9天进行细胞计数和ALP含量检测。(3)传代压力实验组:原代接种细胞经过常规培养和多次传代,细胞生长停滞或明显减慢时检测ALP(-),按照原代压力实验组压力条件进行加压,检测ALP。另设对照组,除不加压力外,其余条件同实验组。 结果:(1)骨髓基质细胞在体外培养可以自然转化或经诱导转化为成骨细胞,经过诱导的细胞比自然分化的细胞较早出现分化。(2)施加间断压力的骨髓基质细胞和对照组相比其增殖、分化速度快,经统计学分析该差别有统计学意义。随着加压时间延长,两组增殖、分化速度无明显差别。(3)衰老退化的骨髓基质细胞在间断压力作用下没有增殖和分化的明显改变。结论:(l)骨髓基质细胞是一种具有.多向分化潜能的干细胞,在体外培养可以分化为成骨细胞。(2)合理的体外培养和适当的生物外力可以促进离体培养的成人骨髓基质细胞的增殖和分化。(3)间断压力对衰老退化的骨髓基质细胞增殖和分化没有明显作用。
其他文献
目前我国城市道路立体绿化建设停留在提升街道基本环境的层面上,较少考虑市民的活动和参等深层次问题。本文以人的活动为基础,运用行为—场所理论的方法对城市道路立体绿化公
目的研究NF1基因27b内含子上的镶嵌基因OMGP与Ⅰ型神经纤维瘤病(NF1)的发病是否相关.方法设计5对互相嵌套能扩增OMGP基因整个表达序列的引物,应用PCR-SSCP(聚合酶链反应-单链
会议
本文从“徒劳”这两个字入手,围绕着贯穿在男女主人公内心深处的一种复杂的情绪展开写作,展示了男女主人公对于生活的执着追求。于平淡与哀愁中,解释人物复杂的心理,从而更深
伴随市场经济及科技的高速发展,网络问政越来越成为广大人民参与国家政务的一个时尚选择。广大网民通过网络积极表达诉求,建言献策,合法监督;政府亦可通过网络“问计于民”、“问
聚偏氟乙烯(PVDF)作为一种常见的超滤、微滤、渗透蒸发薄膜材料,具有优良的热稳定性、化学稳定性、疏水性及生物相容性等,在生物、医药等各个领域均表现出良好的应用前景。近
灵芝是我国传统的药食珍品,硒则是人体的必需微量元素,以灵芝子实体进行生物富硒的研究,国外未有报导,国内也较少见而且尚待深入。因此,本实验对填补基础领域研究的空白、探索应用
近年来,我国医疗费用的快速上涨已经成为老百姓关心的重要问题,甚至是首要问题。昂贵的就医费用已远远超过人们的承受能力,近似天价的医疗费使广大老百姓对医院等医疗机构望而却
前任国务院总理温家宝在2011年的一次讲话中尖锐地指出“诚信的缺失、道德的滑坡已经到了何等严重的地步”,此话一出,在社会上引发了广泛的反响,因为它深刻地道出了当下个体
采用故事讲述任务,考察6-7岁自闭症儿童和典型发展儿童指称引入的表现,发现自闭症儿童的指称引入能力存在滞后,表现为:(1)自闭症儿童不定指形式使用明显不足;(2)在不定指形式