干细胞移植结合机械性心肌血运重建术对兔心梗的修复作用

来源 :昆明医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hzqifeng
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目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)心肌移植结合机械性透壁心肌血运重建术(transmyocardial revascularization,TMR)对兔急性心肌梗死的修复作用。方法:抽取并分离兔MSCs,贴壁培养法体外培养、扩增,经5-氮胞苷(5-aza)诱导后用DAPI标记。新西兰兔22只,随机等分两组:(1)对照组:心梗后注射移植细胞(MI+Cell);(2)实验组:心梗后行机械性TMR并注射等量移植细胞(MI+TMR+Cell)。制备实验性心梗动物模型;实验组心梗30min后实施机械性TMR,术后10min于TMR微孔道凝血块内及其周围心肌多点注射由DAPI标记的MSCs;对照组仅注射等量由DAPI标记的MSCs。两组动物分别于细胞移植后1天、4周行心脏彩色多普勒超声心动图检查,计算两组动物左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)以及左室舒张末径(LVEDD),进行心功能对比评价;细胞移植4周后处死全部动物,采集移植区心肌标本,用荧光示踪法观察移植细胞在缺血坏死区心肌存活情况,免疫组化鉴定移植细胞是否向心肌细胞转化;并通过免疫组化Ⅷ因子相关抗原染色法观察心肌毛细血管密度。结果:经不同时相点超声心动图检查发现,两组在移植后1天EF、FS以及LVEDD差异均无统计学意义(p>0.05);移植后4周,实验组EF、FS均明显高于对照组(p均<0.01),LVEDD低于对照组(p<0.01),两组动物梗死区均可见蓝色荧光的DAPI标记的移植细胞,实验组移植细胞分布广泛而对照组移植细胞分布局限;肌钙蛋白T(troponin T)免疫组化染色呈阳性,证实MSCs可能向心肌细胞转化;实验组心肌血管密度较对照组明显增加(p<0.05)。结论:MSCs移植结合机械性TMR与单纯的MSCs移植相比,能更有效地促进心梗区毛细血管新生以及移植细胞的存活和生长,改善心功能。
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