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背景:细胞凋亡增多以及凋亡细胞清除障碍在系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)的发病中起重要作用,尤其是T、B淋巴细胞凋亡增多。间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)不仅具有强大的免疫调控功能,且有调控细胞凋亡作用。研究表明MSCs移植能缓解SLE以及狼疮小鼠的病情,但是MSCs调节细胞凋亡是否参与了狼疮的治疗尚不明确。目的:研究人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord MSCs,hUC-MSCs)对SLE患者以及狼疮小鼠B淋巴细胞凋亡的调节作用,阐明hUC-MSCs治疗SLE的机制。方法:用流式细胞术检测SLE患者及健康对照(Healthy control,HC)外周血B淋巴亚群的凋亡情况。体外分离培养hUC-MSCs,免疫磁珠(Magnetic activated cell sorting,MACS)分选SLE患者外周血CD19+B淋巴细胞,将hUC-MSCs与CD19+B淋巴细胞共培养后,在不同时间点用流式细胞术检测CD19+B淋巴细胞凋亡率的变化。MACS分离BALB/c脾脏B220+的B淋巴细胞,将hUC-MSCs与B220+细胞共培养6、24或48小时后,流式细胞术检测B220+淋巴细胞凋亡率的变化。酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测 SLE 患者血浆中游离肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Soluble TNF related apoptosis inducing ligand,sTRAIL)表达水平,分析其与临床指标相关性。分离SLE患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),与 hUC-MSCs 共培养 24小时后,实时定量 PCR(Quantitative real-time reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测 PBMCs 中 TRAIL、TRAIL 受体 1(TRAIL-R1)和 TRAIL受体2(TRAIL-R2)的mRNA水平。体外用重组人TRAIL处理SLE患者来源的PBMCs,观察不同处理时间后PBMCs中CD19+B淋巴细胞的凋亡率。体外用重组小鼠TRAIL处理小鼠脾脏来源的B220+细胞,观察不同时间下B220+B淋巴细胞的凋亡率。16周龄MRL/lpr小鼠随机分为四组,两组小鼠每只尾静脉注射1 ×106 hUC-MSCs,另外两组小鼠注射等体积无菌磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer saline,PBS)为对照,分别于24小时和4周后处理小鼠,流式细胞术检测外周血、肾脏周围引流淋巴结和脾脏B淋巴细胞凋亡。ELISA检测小鼠血清抗dsDNA抗体,考马斯亮蓝法检测小鼠尿蛋白,HE染色评估狼疮小鼠肾脏病理。另外,10周龄BABL/c小鼠腹腔注射500ul降植烷(pristane)诱导腹腔淋巴细胞凋亡,72小时后随机分为两组,一组腹腔注射1 ×106hUC-MSCs,一组注射等体积PBS,24小时后检测腹腔B淋巴细胞凋亡。结果:SLE患者外周血CD19+B细胞凋亡率显著高于健康对照者;hUC-MSCs体外抑制SLE患者外周血CD19+B细胞凋亡;SLE患者血浆sTRAIL水平升高,且与尿蛋白呈正相关;hUC-MSCs显著降低共培养SLE患者PBMCs中TRAIL、TRAIL-RI的mRNA水平;hUC-MSCs抑制BABL/c小鼠脾脏来源的B220+B淋巴细胞凋亡;hUC-MSCs移植MRL/lpr小鼠24小时后外周血、脾脏以及淋巴结中B220+B细胞凋亡率无显著变化;hUC-MSCs移植MRL/lpr小鼠一个月可显著降低血清抗dsDNA抗体水平,缓解肾脏淋巴细胞浸润,但是对外周血、脾脏以及淋巴结B220+细胞凋亡率无显著影响;Pristane诱导可使BABL/c小鼠腹腔淋巴细胞凋亡增多,hUC-MSCs注射后腹腔B淋巴细胞的凋亡率下降。结论:hUC-MSCs在体外条件下可降低狼疮患者以及小鼠B淋巴细胞凋亡,在体内可以降低Pristane诱导的B淋巴细胞,这可能是hUC-MSCs移植治疗SLE和改善B淋巴细胞减少的机制之一。