目的:优化青钱柳多糖提取工艺,观察青钱柳及其组方对T2DM模型的影响与作用机制的探讨。方法:1.采用水提醇沉法,通过单因素试验及正交试验对提取温度、料液比、提取时间来研究青钱柳中多糖的最佳提取工艺。2.采用高脂饲料联合低剂量链脲佐菌素诱导Ⅱ型糖尿病模型,检测大鼠的基本状态、体重、血糖、血脂及观察胰腺组织的病理学状态。3.采用实时荧光定量PCR检测股四头肌肌肉组织中IRS-1、PI3K、AKT、GLUT-4 mRNA含量表达。结果:1.青钱柳多糖提取工艺优化结果:最佳的提取工艺是提取温度为90℃,料液比为1:40,提取时间为1h,此条件下青钱柳多糖提取率最高,为2.45%。2.(1)大鼠基本状态:正常对照组大鼠在实验期间持续保持稳定良好的状态,精力充沛,活动灵敏,性格温顺,毛色白亮。给药前T2DM模型大鼠,慵懒少动,行为暴躁,毛色发黄脱落,出现明显的多食,多饮,多尿,消瘦症状。给药后,给药组和阳性对照组大鼠“三多一少”症状有不同程度的减轻。(2)各组大鼠体重的变化:造模前各组间大鼠体重无显著性差异。喂食高脂饲料4周后各组大鼠体重均上升,造模组尤甚。注射链脲佐菌素(STZ)后,与正常对照组比较,其余各组大鼠体重明显减轻。给药8周后,给药组(除青钱柳多糖高剂量组外)、阳性对照组和模型组大鼠的体重都有所增加。(3)各组大鼠血糖的变化:注射STZ前各组间大鼠血糖无显著性差异。给药前,造模组大鼠血糖明显升高。给药后,与模型组比较,青钱柳多糖低剂量组,青钱柳组方低、中、高剂量组和阳性对照组对大鼠的血糖下降明显。青钱柳水提物组和青钱柳多糖高剂量组大鼠血糖小幅度下降。(4)各组大鼠血脂的变化:与正常对照组比较,模型组大鼠总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL)下降。与模型组相比,给药组和阳性对照组的TC、TG和LDL均小于模型组,HDL均大于模型组。(5)大鼠胰岛细胞形态学观察:正常对照组大鼠胰腺内胰岛呈圆形或椭圆形,细胞数量较多,细胞核大而圆,排列整齐,边界清晰。模型组大鼠胰岛细胞数量明显减少,胰岛结构遭到严重破坏,形状不规则,边界模糊。胰岛细胞数量明显减少,排列紊乱,出现萎缩、纤维化和炎性浸润。给药组和阳性对照组胰岛结构较完整,边界较清晰,呈近椭圆,胰岛细胞排列较整齐,细胞形态较完整,胞浆丰富且核居中,只见少数细胞变性或坏死。3.与正常对照组比较,模型组的IRS-1、PI3K、AKT、GLUT-4的表达水平均下调。与模型组相比,阳性药物组、青钱柳多糖低剂量和青钱柳组方低、中、高剂量对IRS-1、PI3K、AKT、GLUT-4表达水平显著上调。结论:1.青钱柳多糖最佳提取工艺为提取温度为90℃,料液比为1:40,提取时间为1h。2.青钱柳及其组方能对T2DM大鼠有降血糖作用,并且对血脂也有调节作用。3.青钱柳及其组方可以改善外周胰岛素抵抗,其机制可能通过激活PI3K/AKT信号通路,上调IRS-1、PI3K、AKT、GLUT-4 mRNA含量表达,降低外周胰岛抵抗,增强胰岛功能。