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毒氟磷作为一种抗病毒剂,具有良好的抗烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)活性。本课题组以毒氟磷为基础,合成了一系列具有高活性的手性α-氨基膦酸酯类化合物,并对该系列化合物进行了生物学筛选。研究表明,手性对映体GUFCC-039-R的活性大于GUFCC-039-S的活性。但是,GUFCC-039-R的作用机制是什么,我们还不是很清楚。本论文以烟草花叶病毒外壳蛋白(tobacco mosaic virus coat protein,TMV CP)为潜在靶标蛋白,以手性α-氨基膦酸酯类衍生物为配体小分子,通过荧光滴定和等温滴定量热法等方法研究活性小分子与TMV CP之间的相互作用。通过分子对接寻找GUFCC-039-R与TMV CP可能的作用位点,通过基因的定点突变获得突变体。然后,通过荧光滴定、等温滴定量热法和微量热泳动法研究GUFCC-039-R与TMV CP WT及其突变体之间的相互作用,验证其作用位点。明晰手性对映体的高活性机制,有助于进一步设计合成出高活性的手性化合物。研究结果表明,GUFCC-039-R与TMV CP的结合能力大于GUFCC-039-S,R体与TMV CP有3个结合位点,且与三种突变体的结合力均降低,降低最明显的是TMV CP R90G,然后对体外重组的三种突变病毒进行活体处理,发现缺失Arg90的病毒没有了感染烟草的能力,说明R体与TMV CP的Arg90结合,导致病毒失去侵染的能力;继而研究了其他5对手性α-氨基膦酸酯类衍生物(GUFCC-003、GUFCC-009、GUFCC-011、GUFCC-013、GUFCC-023)与TMV CP WT之间的相互作用。它们与TMV CP WT的结合力强弱具有共同规律:R体>消旋体>S体,表现出一定的差异性。