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忍冬科忍冬属灰毡毛忍冬Lonicera macran thoides Hand.-Mazz.是湖南省金银花药材的主流品种,其干燥花蕾或带初开的花作为中药山银花已列入2005年版《中国药典》。灰毡毛忍冬作为中药材可用于痈肿疔疮,喉痹,丹毒,热毒血痢,风热感冒,温热发病等疾病的治疗。灰毡毛忍冬的主要有效活性成分绿原酸类物质,是我国作为绿原酸产品的主要来源之一,其绿原酸类物质的含量也比传统金银花高。国内对灰毡毛忍冬的报道很少,特别是绿原酸类物质的分离纯化工艺及其药理药效功能,均未见详细报道,严重阻碍了以灰毡毛忍冬为原料的天然药物和功能性食品的研究开发,随着国际交流的不断发展深入,灰毡毛忍冬可以作为主要资源推进国际市场。本文对灰毡毛忍冬中绿原酸类物质的提取、分离、纯化工艺进行了研究,以期为合理开发利用灰毡毛忍冬资源利用提供可靠的理论依据和技术支持。1绿原酸类物质检测方法的确定(1)紫外分光光度法以绿原酸标准品为参考,进行全波长扫描,确定绿原酸标准品和样品在波长为327nm处有最大吸收峰;制定标准曲线,回归方程为:y=0.0198x+0.0005,r=0.9993,在0.002~0.01mg/mL范围内检测溶液的浓度与吸光度有良好的线性关系。(2)高效液相色谱法绿原酸类物质的浓度和含量检测采用高效液相色谱法,检测条件为:色谱仪:LC-10ATVP高效液相色谱仪(日本岛津)色谱柱:色谱柱(大连化物所Kromasil 200 mm×4.6 mm 5μ)流动相:乙腈-0.1%冰醋酸溶液(13:87)检测波长:327 nm进样量:10μl流速:1 ml/min柱温:35℃2灰毡毛忍冬中绿原酸类物质的提取技术研究优化了灰毡毛忍冬中绿原酸类物质的提取技术参数,得到其最佳提取条件,浸提参数为:70%乙醇溶液,时间60min,料液比为1:12,浸提温度:70℃,pH值为5,浸提次数2次,绿原酸类物质含量为:6.55%。3灰毡毛忍冬中绿原酸类物质的分离纯化技术研究绿原酸类物质的分离纯化主要是采用大孔树脂法,通过筛选各种类型的大孔树脂,静态吸附试验和动态吸附试验的结果显示:大孔树脂NKA-9对绿原酸类成化合物的吸附量27.78 mg/ml,解析率可到达85.3%,其动态吸附量为:27.55 mg/ml。经大孔树脂分离纯化后得到的产品纯度为:75.68%,其回收率为82.38%。