目的:探讨酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitor,TKI)对慢性髓性白血病铁自噬的影响。方法:1.体外实验1.1细胞培养:慢性髓性白血病细胞株K562和KCL22用于体外培养,取对数生长期细胞进行后续实验。1.2采用CCK-8法检测K562和KCL22细胞株增殖抑制率。1.3采用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR检测K562和KCL22细胞株空白对照组、TKI组铁自噬相关因子FTH1、NCOA4的蛋白和mRNA表达。1.4采用铁含量检测试剂盒检测各组细胞内铁离子含量。2.体内实验2.1收集临床资料纳入2017年12月到2019年3月就诊于我院的慢性髓性白血病患者共9名。收集每位患者一般资料、应用TKI前后血常规、骨髓BCR-ABL转录水平及骨髓标本等资料。2.2将骨髓标本进行有核细胞提取与保存。2.3观察指标2.3.1用Sysmex XE-2100全自动血液分析仪检测患者血常规。2.3.2采用AB7500型荧光定量PCR仪和TaqMan探针法检测患者骨髓标本中BCR-ABL拷贝数。2.3.3采用Western Blot法检测患者应用TKI前后的铁自噬相关因子NCOA4、FTH1的蛋白表达。结果:1.体外实验结果:1.1不同浓度的TKI作用K562和KCL22细胞株不同时间后,测定增殖抑制率见图1、图2和表1、表2,结果显示随着TKI浓度的增加和作用时间的延长,K562和KCL22的增殖抑制率均逐渐增高(P<0.05)。1.2经Western Blot、RT-qPCR分析TKI对慢性髓性白血病细胞株K562和KCL22铁自噬相关因子FTH1、NCOA4蛋白和mRNA影响。TKI(0.5 ug/ml、1ug/ml)处理慢性髓性白血病细胞株K562和KCL2212h后,与对照组相比,TKI组铁自噬相关因子FTH1、NCOA4的蛋白和mRNA表达水平下降,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)(见图3、图4、图5、图6;表3、表4、表5、表6)。1.3不同浓度的TKI作用K562和KCL22细胞株12小时后,测定细胞内铁相对表达量显示,随着TKI浓度的增加,K562和KCL22的细胞内铁相对含量均逐渐增高(P<0.05)。(见图7;表7)。2.体内实验结果:2.1与TKI用药前相比,用药后3个月患者白细胞和血小板计数明显下降,用药后3个月患者BCR-ABL转录水平明显降低(见表8)。2.2经Western Blot法分析慢性髓性白血病患者TKI用药前和用药后3个月铁自噬相关指标FTH1、NCOA4蛋白水平,与TKI用药前比较,用药后3个月铁自噬相关因子FTH1、NCOA4的蛋白表达下降,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(见图8;表9)。结论:TKI可以促进慢性髓性白血病铁自噬。