鸡组织中甲砜霉素和氟苯尼考残留的检测方法及消除规律

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氯霉素被国内外禁用于所有食品动物后,作为氯霉素类药物的甲砜霉素和氟苯尼考,在畜牧业中得到广泛应用,对畜禽疾病的控制和治疗起到了重要的作用。随着甲砜霉素和氟苯尼考的广泛应用及研究的深入,发现其仍有许多毒副作用,因此,必须控制甲砜霉素和氟苯尼考在动物性食品中的残留,以保障消费者健康与安全。本文研究了鸡组织中甲砜霉素和氟苯尼考残留的高效液相色谱检测方法(High performance liquid chromatography,HPLC),并进一步探讨了肉仔鸡连续3天内服甲砜霉素和氟苯尼考(剂量均为200mg/Kg.b.w.d)后,停药后不同时间(1d、3d、5d、7d、9d、11d、13d、15d)肌肉、肝脏、肾脏组织中甲砜霉素与氟苯尼考残留量的变化及消除规律。主要结果如下:1.HPLC检测甲砜霉素与氟苯尼考残留方法的建立将组织样品肌肉、肝脏、肾脏分别制成匀浆,用乙酸乙酯提取,正己烷去脂后用乙酸乙酯反萃取,经固相萃取柱(SPE)净化,甲醇洗脱,采用HPLC进行检测。色谱条件为:紫外检测波长:224nm,柱温:30℃,流动相:0.025mol·L-1磷酸/三乙胺(pH3.0)—乙腈(v/v,80:20),流速:1.0ml·min-1,进样量:20μL,色谱柱:Warers Symmtry C18(250mm×4.6mmi.d.,填料粒径为5μm)。甲砜霉素和氟苯尼考在同时检测时的保留时间分别为7.30min和17.60min,测得甲砜霉素标准品在肌肉、肝脏、肾脏组织中的检测限(LOD)分别为5ng·g-1、10ng·g-1、10ng·g-1,测得氟苯尼考标准品在肌肉、肝脏、肾脏组织中的检测限(LOD)分别为10ng·g-1、10ng·g-1、10ng·g-1。在10~1000ng·g-1的范围内,浓度(C)与峰面积(S)呈良好的线性关系,其线性方程分别为:甲砜霉素:C=0.0200S-0.0076,(相关系数R=0.9997);氟苯尼考:C=0.0226S-0.0275,(相关系数R=0.9991)。甲砜霉素在不同组织中的回收率和相对标准偏差(RSD)的平均值依次为:肌肉73.93%、9.50%,肝脏69.57%、9.97%,肾脏72.64%、10.05%。氟苯尼考在不同组织中的回收率和相对标准偏差(RSD)的平均值依次为:肌肉73.58%、11.08%,肝脏70.26%、10.19%,肾脏68.97%、8.20%。甲砜霉素在不同组织中的日内变异系数及日间变异系数(C.V)依次为:肌肉3.89%、6.27%,肝脏5.36%、9.14%,肾脏5.96%、9.08%。氟苯尼考在不同组织中的日内变异系数及日间变异系数(C.V)依次为:肌肉4.13%、7.78%,肝脏4.72%、11.13%,肾脏5.01%、11.99%。上述结果表明,本文所建立的同时检测鸡组织中(肌肉、肝脏、肾脏)甲砜霉素与氟苯尼考残留的高效液相色谱法灵敏可靠。2.肉仔鸡连续内服甲砜霉素与氟苯尼考后残留消除规律肉仔鸡连续3天内服甲砜霉素和氟苯尼考(剂量为200mg/Kg.b.w.d)后的不同时间(1d、3d、5d、7d、9d、11d、13d、15d)检测肌肉、肝脏、肾脏组织中甲砜霉素与氟苯尼考残留量的变化。结果显示:甲砜霉素在停药后第7d各组织中药物残留量均高于MRLs;停药第9d,肌肉组织中的残留量低于MRLs;停药第11d后,各组织中药物残留量均低于MRLs。氟苯尼考在停药后第5d后各组织中药物残留量均低于MRLs。因此,甲砜霉素原形药物残留的休药期建议为11d左右,氟苯尼考原形药物残留的休药期建议为5d左右。但因为甲砜霉素与氟苯尼考尚有其它代谢产物的残留,其实际休药期应比原形药物残留的休药期更长。
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