鱼肝油是从鱼类肝脏中提取出的天然提取物,主要含有的营养成分为天然维生素A、天然维生素D以及多种不饱和脂肪酸。目前对鱼肝油的质量鉴别方法尚不明确。本文建立维生素D含量测定新方法和维生素A含量测定新方法,成功将鱼肝油与维生素AD滴剂加以区分,并鉴别其质量,初步确定天然鱼肝油中维生素D的部分存在形式。并使用气相色谱法检验天然鱼肝油中辅料油是否为植物油。方法:运用液相色谱技术,建立一种新的维生素D含量测定方法（适用于维生素D单体检测）,与药典方法对比证明其可行性,对新方法进行方法学验证,并将新方法应用于鉴别鱼肝油与维生素AD滴剂。通过层析法和液相分离手段,成功分离出部分维生素D相关物,并初步确定其结构。另一方面,建立了一个新的维生素A含量测定方法,并进行了方法学验证。运用气相色谱系统将各种油脂中的脂肪酸含量进行对比分析,将鱼肝油的辅料加以区别,为制定理想的质量标准奠定基础。结果:（一）本研究回避皂化过程,将样品直接注入液相系统中净化收集维生素D流出液,加以分析。净化制备用色谱条件为:C18色谱柱;检测波长254 nm;流动相为100%甲醇;进样量200 μL;流速1.0 mL/min;柱温30℃。制备的维生素D使用检测用液相系统进行含量测定。经方法学验证,该方法专属性、线性、精密度、准确度、重复性等都符合要求,是简便易行可靠的方法。该方法可以应用于天然鱼肝油的鉴定中,将天然与“人工”添加型鱼肝油（包括维生素AD滴剂等）加以区分,填补了《中国药典》中鱼肝油鉴定领域的空缺。（二）本实验成功地分离出鱼肝油中的维生素D相关化合物,初步确定为维生素D3-二十碳五稀酸酯（VD3-EPA酯）和维生素D3-二十二碳六稀酸酯（VD3-DHA 酯）。（三）本研究成功建立了一种维生素A含量测定方法,其色谱条件为:C18色谱柱,甲醇:水=81:19为流动相,进样量10μL,流速1.0mL/min,检测波长325 nm,柱温40℃。经方法学验证,显示该方法专属性、线性、精密度、准确度、重复性等都符合要求,是通用型维生素A含量测定方法。本研究证明天然鱼肝油中无维生素A醋酸酯,并且应用于鱼肝油和维生素AD滴剂的鉴别项中。（四）在升温梯度为160℃、190℃、230℃,保留时间分别为5 min、5 min、20min的特定气相色谱条件下,定位亚油酸、EPA、DHA出峰时间。分析结果显示各类植物油中含有丰富的亚油酸,但未检测有EPA与DHA,鱼油和鱼肝油中亚油酸含量很少,EPA和DHA含量较多。通过制定亚油酸、EPA和DHA的比例限度,能够控制鱼肝油辅料选择,进一步提高质量标准。结论:本文通过建立含量测定新方法对鱼肝油中维生素D、维生素A进行分析研究,使用气相色谱法分析鱼肝油中各类脂肪酸占比,有效评价鱼肝油的质量。同时初步确定了鱼肝油中部分维生素D相关物质的结构。