金花茶化学成分的分离鉴定及其活性评价

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目的:金花茶系山茶科落叶小灌木,是一种药食同源型珍贵植物,其花为罕见的金黄色,被誉为“植物界的大熊猫”。本实验对金花茶叶的化学成分进行了分离纯化和结构表征,同时对分离得到的单体化合物进行了抗肿瘤活性筛选和抑制群体感应活性评价,从而为金花茶叶中抗肿瘤药物的发现和非经典抗菌因子的发现提供科学依据。方法:通过运用正向硅胶,C18反向硅胶,MCI,Sephadex LH-20柱层析,中压柱以及高效液相色谱仪等从金花茶叶的二氯甲烷和乙酸乙酯部位分离提取出单体化合物,并利用液态核磁共振仪和质谱仪等对化合物的结构进行表征,从而达到鉴定的目的。随后对鉴定出的单体化合物进行活性评价,涉及到的实验包括利用CCK-8法测定化合物的细胞增殖和毒性分析,MTT法测定化合物的抗肿瘤活性。细菌群体感应模型测定化合物的抑制细菌群体感应活性。结果:从金花茶叶子中共分离鉴定出18个化合物,分别为(1)α-波甾醇吡喃葡萄糖苷(2) stigmasta-7,22-diene-3-O-[a-L-arabinopyranosyl(1→2)]-β-D-galactopyranoside (3) kaempferol 3-O-[2-O-(trans-p-coumaroyl)-3-O-a-D-glucopyranosyl]-α-D-glucopyranoside, (4) aromadendrin (5) catechin (6) phlorizin 4’-O-β-D-glucopyranoside (7) (3R,6R,7E)-3-hydroxy-4,7-megastigmadien-9-one (8)正十二烷酸(9)3β-acetoxy-20-lupanol (10) 3β,6α,13β-trihydroxyolean-7-one (11)22α-当归酰基-玉蕊醇Al(12) 3β,6α, 13β-trihydroxyolean-7-one (13)黑果茜草萜(14)β-D-Galactopyranoside, (2S)-2-(acetyloxy)-3-[[(9Z)-1-oxo-9-octadecen-1-yl]oxy]propyl (15) β-D-Glucopyranoside,3-[(1-oxo-9,12,15-octadecadienyl)oxy]-2-[(1-oxo-9,12,15-octadecatrienyl)oxy] (16) β-D- Gluc-opyranoside,3-[(1-oxo-9,12-octadecadienyl)oxy]-2-[(1-oxo-9,12,15-octadecatrienyl)oxy]prop yl (17) β-D-Glucopyranoside,2-[[(9Z,12Z,15Z)-1-oxo-9,12,15-octadecatrien-1-yl] oxy]-3-[(1-oxooctyl)oxy]propyl (18)p-谷甾醇。除了化合物(4),(5)和(18)以外,其他化合物均为从该种中首次分离得到。对分离得到的这些单体化合物进行抗肿瘤活性和抑菌活性筛选结果显示,虽然均尚未表现出群体感应抑制活性,但化合物(11)对人肺癌细胞A549,人胃癌细胞HGC-27,人乳腺癌细胞MDA-MB-435,人结肠癌细胞SW620均表现出了较强的抑制作用;化合物(10)对细胞SGC7901的生长表现出了较强的抑制作用,IC50为91.7μg/mL。
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